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肝细胞的三维受控组装

清华大学学报（自然科学版） 2005年第8期45卷 1009-1011,1031页

作者：刘海霞颜永年王小红熊卓程捷清华大学机械工程系北京100084

为解决肝病救治中肝供体缺乏的问题,采用基于快速成形技术的细胞组装机,将肝细胞和海藻酸钠与明胶复合材料的共混物作为成形对象,通过细胞材料直接三维受控组装技术,实现了堆积成形具有一定三维结构和预定义孔隙的肝组织前体。常规体外... 详细信息

为解决肝病救治中肝供体缺乏的问题,采用基于快速成形技术的细胞组装机,将肝细胞和海藻酸钠与明胶复合材料的共混物作为成形对象,通过细胞材料直接三维受控组装技术,实现了堆积成形具有一定三维结构和预定义孔隙的肝组织前体。常规体外培养条件下,肝细胞存活并保持生物学活性达12d之久。这一技术有望成为肝脏及其他人体组织器官人工构造的新途径。

关键词：快速成形细胞组装机肝细胞三维受控组装人工肝

肝细胞中二甲双胍对磷酸烯醇丙酮酸羧激酶基因表达的抑制作用

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Chinese Medical Journal 2002年第12期115卷 1843-1848页

作者：袁莉 ReinhardZiegler 等华中科技大学同济医学院附属协和医院内分泌科，武汉430022 DepartmentofEndocrinologyandMetabolismUniveristyHospitalHeidelbergHeidelberg69115Germany

目的:通过观察抗高血糖药物二甲双胍对肝糖异生中的限速酶磷酸烯醇丙酮酸羧激酶（PEPCK）基因表达的调节以及胰岛素信号转导抑制剂的影响，以探讨二甲双胍在肝细胞中作用的分子机制。方法：将小鼠肝癌细胞系（H4IE）细胞用不同浓度的二... 详细信息

目的:通过观察抗高血糖药物二甲双胍对肝糖异生中的限速酶磷酸烯醇丙酮酸羧激酶（PEPCK）基因表达的调节以及胰岛素信号转导抑制剂的影响，以探讨二甲双胍在肝细胞中作用的分子机制。方法：将小鼠肝癌细胞系（H4IE）细胞用不同浓度的二甲双胍温育１６小时，加入不同的调节因子如胰岛素、环磷酸腺苷（cAMP）、地塞米松、胰岛素信号转导抑制剂等。PEPCK的mRNA水平通过Northern杂交分析。结果：治疗浓度0.1mmol/L二甲双胍显著降低了基础PEPCK的mRNA水平，并通过与胰岛素的联合作用抑制了cAMP/地塞米松刺激的PEPCK的基因表达。胰岛素信号转导抑制剂如磷酯酰肌醇－３激酶（P13K）抑制剂渥蔓青霉素（wortmannin）和有丝分裂原激活蛋白激酶（MAPK）抑制剂UO126对二甲双胍的作用无显著影响，但wortmannin显著阻止了胰岛素对PEPCK基因表达的调节作用。结论：二甲双胍可通过独立的非胰岛素信号转导途径或是与胰岛素的联合作用抑制PEPCK的基因表达，表明二甲双胍降低肝糖异生的分子机制可能与PEPCK基因表达的抑制有关。

关键词：二甲双胍磷酸烯醇丙酮酸羧激酶糖异生胰岛素肝细胞信号转导

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人肝细胞中总砷及砷代谢产物分析方法研究

分析化学 2009年第1期37卷 19-24页

作者：曹煊余晶晶王庚于振花杨黄浩徐苑苑孙贵范王小如中国海洋大学化学化工学院国家海洋局第一海洋研究所山东大学化学与化工学院中国科学院海洋研究所中国医科大学公共卫生学院

本工作研究了冷消解、微波消解、高压密闭消解方法对超声破碎后细胞中砷的ICP-MS测定的影响,并与直接进样测定结果作对比。结果表明,微波消解法和高压密闭消解法效果较好,测定的精密度以RSD表示,分别为2.1%和1.2%;日间6次测定的精密度... 详细信息

本工作研究了冷消解、微波消解、高压密闭消解方法对超声破碎后细胞中砷的ICP-MS测定的影响,并与直接进样测定结果作对比。结果表明,微波消解法和高压密闭消解法效果较好,测定的精密度以RSD表示,分别为2.1%和1.2%;日间6次测定的精密度分别为1.2%和2.0%;元素加标回收率均在95.7%～108.1%范围。用4种消解方法对应的ICP-MS方法检出限介于0.74～0.93μg/l之间,符合痕量分析要求。本工作还建立了高效液相色谱(HPLC)与电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)联用技术对1μmol/L染砷组细胞样品中的砷化学形态进行了初步探讨,发现细胞内除了存在无机砷(As(Ⅲ)和As(Ⅴ))外,同时存在二甲基砷(DMA)和一种甲基砷中间代谢产物。

关键词：细胞消解高效液相色谱电感耦合等离子体质谱肝细胞砷化学形态

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肝细胞癌肝部分切除术后营养支持的效果

中华肿瘤杂志 2018年第10期40卷 787-792页

作者：刘发强王黎明荣维淇吴凡吴健雄国家癌症中心国家肿瘤临床医学研究中心中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院肝胆外科 100021

目的探讨不同营养支持方法对肝细胞癌（HCC）肝部分切除术后的疗效。方法选择2010年1月至2013年12月就诊于中国医学科学院肿瘤医院的379例HCC肝部分切除术后患者，按营养支持方法分为术后早期肠内营养支持（EEN）＋肠外营养支持（PN）... 详细信息

目的探讨不同营养支持方法对肝细胞癌（HCC）肝部分切除术后的疗效。方法选择2010年1月至2013年12月就诊于中国医学科学院肿瘤医院的379例HCC肝部分切除术后患者，按营养支持方法分为术后早期肠内营养支持（EEN）＋肠外营养支持（PN）组和全胃肠外营养支持（TPN）组。其中EEN＋PN组142例，术后连续4 d使用EEN联合PN；TPN组237例，术后连续4 d使用TPN。EEN＋PN组和TPN组再分为2个亚组，即中央型HCC（cl－HCC）亚组和周围型HCC（ncl－HCC）亚组。分析不同营养支持方法对EEN＋PN组和TPN组及其亚组患者的疗效。结果EEN＋PN组和TPN组及其亚组患者的性别、年龄、体质指数、肿瘤大小、术中出血量、术后并发症发生率和术后感染率差异均无统计学意义（均P〉0.05）。术后第7天，EEN＋PN组和TPN组患者的门冬氨酸氨基转移酶（AST）分别为（41.6±2.0）IU/L和（50.4±3.2）IU/L，碱性磷酸酶（ALP）分别为（80.8±2.4）IU/L和（90.2±2.3）IU/L，总胆红素（TBIL）分别为（15.8±0.7）μmol/L和（19.1±0.7）μmol/L，差异均有统计学意义（均P〈0.05）。术后第7天，EEN＋PN组和TPN组中cl－HCC亚组患者的AST分别为（39.6±2.6）IU/L和（61.0±7.0）IU/L，TBIL分别为（14.4±0.9）μmol/L和（20.7±1.3）μmol/L，差异均有统计学意义（均P〈0.05）。术后第7天，EEN＋PN组和TPN组中ncl－HCC亚组患者的ALP分别为（79.3±3.0）IU/L和（89.9±3.1）IU/L，差异有统计学意义（P〈0.05）。EEN＋PN组和TPN组患者的总住院时间分别为（15.8±0.4）d和（17.1±0.4）d，，术后住院时间分别为（8.6±0.2）d和（10.1±0.3）d，差异均有统计学意义（均P〈0.05）。EEN＋PN组和TPN组中ncl－HCC亚组患者的总住院时间分别为（15.1±0.5）d和（16.6±0.3）d，术后总住院时间分别为（8.4±0.2）d和（9.5±0.2）d，差异均有统计学意义（均P〈0.05）。EEN＋PN组和TPN组中cl－HCC亚组患者的术后住院时间分别为（8.7±0.2）d和（11.0±0.8）d，差异均有统计学意义（均P〈0.05）。EEN＋PN组和TPN组患者的术后住院费用分别为（20 855.0±549.8）元和（23 373.0±715.5）元，差异有统计学意义（P〈0.05）；EEN＋PN组和TPN组中cl－HCC亚组患者的术后住院费用分别为（21 012.0±748.5）元和（24 697.0±1 409.0）元，差异有统计学意义（P〈0.05）。结论EEN＋PN有利于肝部分切除术后HCC患者的肝功能恢复，缩短术后住院时间，减少术后住院费用。

关键词：癌肝细胞营养支持临床效果

肝细胞向胆管上皮细胞转分化在继发性胆汁淤积性大鼠肝纤维化形成中的作用及黄芪汤组分的干预效应

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中国中西医结合杂志 2010年第5期30卷 513-518页

作者：邱冰峰都金星申定珠陈高峰刘平上海中医药大学附属曙光医院上海市中医药研究院肝病研究所.肝肾疾病病证教育部重点实验室上海201203 上海高校中医内科学E-研究院杭州师范大学附属医院杭州310015

目的探讨肝细胞向胆管上皮细胞转分化在继发性胆汁淤积性大鼠肝纤维化形成中的作用及黄芪汤组分抑制肝纤维化的效应机制。方法 75只SD雄性大鼠,采用胆总管结扎(bile duct ligation,BDL)制备继发性胆汁淤积性肝纤维化模型,假手术组(Sham... 详细信息

目的探讨肝细胞向胆管上皮细胞转分化在继发性胆汁淤积性大鼠肝纤维化形成中的作用及黄芪汤组分抑制肝纤维化的效应机制。方法 75只SD雄性大鼠,采用胆总管结扎(bile duct ligation,BDL)制备继发性胆汁淤积性肝纤维化模型,假手术组(Sham)仅作胆总管分离,不作胆总管结扎。大鼠BDL术后1周随机分为对照组(M)与干预组(Y组,经灌胃给予黄芪汤组分4周),Sham组于术后1周末随机抽取5只大鼠处死取材,M组分别于术后1、2、3、4周末随机抽取5只大鼠做动态观察,余下各组大鼠均于术后第5周末处死取材。观测肝脏组织学及羟脯氨酸(Hyp)含量;激光共聚焦显微镜观察肝组织胆管上皮细胞标志物角蛋白-7(CK7)与肝细胞特异性抗原(HepPar)共定位,Western blot检测CK7、HepPar的蛋白表达,IPP软件分析肝组织天狼猩红胶原染色。结果随着造模时间推移,M组大鼠肝组织肝细胞Hep Par阳性细胞逐渐减少(Sham>M1周>M2周>M3周>M4周>M5周),胆管上皮细胞(CK7阳性细胞)及纤维化程度、Hyp含量、CK7蛋白表达均逐渐增加(Sham细胞于术后1周即见增加,术后3周达到峰值,然后渐趋减少,肝组织Hep par蛋白表达量与CK7蛋白表达量呈显著负相关,Hep Par阳性细胞表达量与CK7阳性细胞表达量、胶原沉积程度均呈显著负相关,而CK7阳性细胞表达量与胶原沉积程度呈显著正相关;与M组比较,Y组大鼠死亡率、CK7阳性细胞、纤维化程度、肝组织Hyp含量、CK7蛋白表达量均显著下降(P细胞及Hep Par蛋白表达含量显著增加。结论肝细胞向胆管上皮细胞转分化可能是继发性胆汁淤积性大鼠肝纤维化形成过程中的关键病理环节,抑制肝细胞向胆管上皮细胞转分化可能是黄芪汤组分有效干预继发性胆汁淤积性肝纤维化的主要效应机制之一。

关键词：继发性胆汁淤积性肝纤维化肝细胞胆管上皮细胞转分化黄芪汤

肝细胞肝癌骨转移在病理生理学及放射治疗中的研究进展

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肿瘤 2015年第2期35卷 225-231页

作者：黄艳何健复旦大学附属中山医院放疗科上海200032

随着肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)诊断技术及治疗方法的进步,近年来HCC患者的总生存期获得明显延长,因此HCC骨转移的发生率也有所提高。HCC骨转移大多数为溶骨性改变,血管形成、上皮-间质转化(epithelial mesenchymal tran... 详细信息

随着肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)诊断技术及治疗方法的进步,近年来HCC患者的总生存期获得明显延长,因此HCC骨转移的发生率也有所提高。HCC骨转移大多数为溶骨性改变,血管形成、上皮-间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)和破骨细胞在HCC骨转移的发生和发展中均有重要作用。而HCC骨转移预测模型的建立,将有利于对HCC骨转移进行早期干预,改善预后。局部放射治疗能显著缓解HCC骨转移的症状,尤其是骨痛症状。因此,本文就HCC骨转移在病理生理学方面的研究进展及放射治疗方面的研究进展作一综述,以期为HCC骨转移的治疗提供一些新的理论依据。

关键词：癌肝细胞肿瘤转移诊断放射疗法生物学

丙型肝炎病毒核心蛋白基因表达致人肝细胞恶性转化的研究

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生物化学与生物物理进展 2004年第3期31卷 213-218页

作者：单于陈系古黄冰胡安斌郭中敏黄文革中山大学实验动物中心广州510080 华中科技大学同济医学院附属协和医院肝胆外科武汉430022

丙型肝炎病毒核心 (HCV C)蛋白是维持丙型肝炎病毒结构的重要蛋白质 ,由于参与调节细胞的生长与凋亡 ,被认为与HCV感染所致的肝硬化及肝细胞癌的发生有关 .为了进一步探索HCV C蛋白与肝细胞癌发生的关系 ,首先构建了表达HCV C蛋白的真... 详细信息

丙型肝炎病毒核心 (HCV C)蛋白是维持丙型肝炎病毒结构的重要蛋白质 ,由于参与调节细胞的生长与凋亡 ,被认为与HCV感染所致的肝硬化及肝细胞癌的发生有关 .为了进一步探索HCV C蛋白与肝细胞癌发生的关系 ,首先构建了表达HCV C蛋白的真核表达载体 ,脂质体介导转染Chang liver人肝细胞株 ,建立表达HCV C蛋白的人肝细胞模型 ,RT PCR方法检测HCV C基因在人肝细胞内的表达 ,蛋白质印迹和免疫细胞化学方法鉴定Chang liver肝细胞内HCV C蛋白及其在细胞内的分布情况 .表达HCV C蛋白的Chang liver人肝细胞培养 2 0代以后 ,与对照组细胞相比 ,细胞的形态出现长梭形样改变 ,生长速度显著加快 ,细胞内DNA含量的均一性变差 .接种表达HCV C蛋白的Chang liver人肝细胞的 6只裸鼠在第 2 0天时全部有肿瘤长出 ,且肿瘤组织结构符合肝细胞癌病理形态特点 ,对照组裸鼠未见肿瘤生长 .上述结果表明HCV C基因表达可导致Chang liver人肝细胞发生恶性转化 ,提示HCV C蛋白与HCV感染所致肝细胞癌的发生有直接关系 .

关键词：丙型肝炎病毒核心蛋白基因表达人肝细胞 HCV-C蛋白恶性转化肝细胞癌 Chang-liver

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小鼠胚胎干细胞分化为肝细胞的基因芯片分析

生物化学与生物物理进展 2009年第1期36卷 95-102页

作者：李岩李雪飞郭坤高东梅赵燕刘银坤复旦大学附属中山医院肝癌研究所上海200032

弄清胚胎肝脏发育的分化调节机制,对指导干细胞在肝再生中的应用以及研究肝分化相关疾病分子机制具有重要意义.胚胎干细胞的全能性使得体外建立肝向分化模型成为可能,采用单层贴壁培养方式,分阶段加入成纤维细胞生长因子(FGF)、肝细胞... 详细信息

弄清胚胎肝脏发育的分化调节机制,对指导干细胞在肝再生中的应用以及研究肝分化相关疾病分子机制具有重要意义.胚胎干细胞的全能性使得体外建立肝向分化模型成为可能,采用单层贴壁培养方式,分阶段加入成纤维细胞生长因子(FGF)、肝细胞生长因子(HGF)、制瘤素(OSM)等因子,诱导小鼠胚胎干细胞D3(mESC-D3)的肝向分化.分化细胞在光镜和电镜下呈现肝样细胞形态,RT-PCR、细胞免疫荧光检测以及PAS染色分析表明,这些细胞具有肝细胞特征性的基因表达和生化功能.采用干细胞分化相关基因芯片比较早期肝定向分化前后的基因表达差异,结果显示,48个差异表达基因中(大于2倍),20个上调、28个下调.进一步的生物信息学分析发现,它们集中体现在细胞外基质、细胞连接、FGF、BMP分子及Notch、Wnt信号通路上,提示这些改变可能与胚胎早期的肝向分化密切相关.

关键词：胚胎干细胞肝细胞细胞分化基因芯片

丙型肝炎病毒NS3蛋白促进人源肝细胞的增殖及其相关机制研究

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生物化学与生物物理进展 2005年第10期32卷 991-997页

作者：李波冯德云程瑞雪孙树艳何琼琼胡忠良郑晖文继舫中南大学湘雅医学院病理教研室长沙410013

丙型肝炎病毒(HCV)NS3蛋白与肝癌细胞(HCC)的发生密切相关,但其机制尚不清楚.既往体外研究极少采用HCV的自然宿主细胞——人肝细胞作为研究体系,故所获研究结果有待进一步探讨和证实.构建了表达HCVNS3蛋白的真核质粒,通过稳定转染人源... 详细信息

丙型肝炎病毒(HCV)NS3蛋白与肝癌细胞(HCC)的发生密切相关,但其机制尚不清楚.既往体外研究极少采用HCV的自然宿主细胞——人肝细胞作为研究体系,故所获研究结果有待进一步探讨和证实.构建了表达HCVNS3蛋白的真核质粒,通过稳定转染人源永生化肝细胞系QSG7701,建立了稳定表达HCVNS3蛋白的人源永生化肝细胞系QSG7701/NS3,以此为实验平台,检测了细胞增殖的变化,丝裂原蛋白激酶(MAPK)通路激酶磷酸化水平的改变及转录因子AP-1、NF-κB和STAT3的活性变化.结果表明:HCVNS3蛋白可促进人源永生化肝细胞QSG7701的增殖,HCVNS3蛋白激活ERKs/AP-1可能是其促进细胞增殖的重要机制,并通过上调转录因子NF-κB和STAT3的活性,诱导宿主细胞急性炎症损伤.

关键词：丙型肝炎病毒NS3蛋白肝细胞丝裂原蛋白激酶(MAPK) 增殖