绵羊肺炎支原体蛋白质组双向电泳图谱的构建
Establishment of Two-dimensional Gel Electrophoresis pattern in Proteomic of Mycoplasma Ovipneumoniae作者机构:河北师范大学分子细菌学实验室河北石家庄050016 河北农业大学兽医卫生检验实验室河北保定071001
出 版 物:《安徽农业科学》 (Journal of Anhui Agricultural Sciences)
年 卷 期:2007年第35卷第11期
页 面:3276-3277,3293页
学科分类:0710[理学-生物学] 071010[理学-生物化学与分子生物学] 081704[工学-应用化学] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术]
基 金:河北省自然科学基金资助项目(C2006000507)
摘 要:为了建立针对绵羊肺炎支原体蛋白质组学研究的双向电泳图谱及其相关技术体系。采用反复冻融兼Urea-CHAPS-DTT-SB3-10裂解法和超声兼Urea-CHAPS-DTT-SB3-10裂解法提取绵羊肺炎支原体菌体蛋白,取200μg菌体蛋白利用固相pH梯度等电聚焦双向电泳,对硝酸银染色后获得的双向电泳图谱进行图像分析。结果表明反复冻融兼Urea-CHAPS-DTT-SB3-10裂解提取法获得198±2个蛋白斑点,超声兼Urea-CHAPS-DTT-SB3-10裂解提取法获得241±2个蛋白斑点。说明超声兼Urea-CHAPS-DTT-SB3-10裂解提取法提高了双向电泳的分辨率,进而可增强生物质谱鉴定蛋白质的准确度。