Cloning of Mouse Enamel Matrix Serine Proteinase Encoding Mature Protein
Cloning of Mouse Enamel Matrix Serine Proteinase Encoding Mature Protein作者机构:Dept. of Pathology School of Stomatology Jilin University Changchun 130041
出 版 物:《吉林大学学报(医学版)》 (Journal of Jilin University:Medicine Edition)
年 卷 期:2003年第29卷第6期
页 面:705-709页
核心收录:
学科分类:0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种]
基 金:The grant was funded by Science Department of Jilin Province(970 5 74 5 )
主 题:牙胚 小鼠 丝氨酸内肽酰类 逆转录聚合酶链反应 聚合酶链反应 克隆 分子
摘 要:目的 :克隆小鼠牙胚组织中釉基质丝氨酸蛋白酶 ( EMSP1 )成熟肽编码区基因。方法 :提取出生后 7d昆明种小白鼠切牙、磨牙牙胚总 RNA,逆转录为 c DNA,设计两对特异性引物 ,采用 Touchdown PCR和嵌套 PCR方法 ,扩增出小鼠 EMSP1起始密码子至终止密码子基因片段。将目的基因连入载体 p MD- 1 8T,转化入大肠杆菌 JM1 0 9,通过蓝白筛选 ,挑选阳性克隆培养扩增 ,纯化重组质粒进行限制性酶切和核苷酸序列分析鉴定。结果 :限制性酶切图谱和核苷酸序列分析均表明所克隆 c DNA为小鼠 70 0 bp的 EMSP1成熟肽基因编码。结论