miR-377-5p通过下调HIF-1α及其相关VEGF信号通路抑制肝细胞癌HepG2细胞的增殖和侵袭

作     者：杨晋 贺凯 张孟瑜 吴力乐 秦蜀 冯春红 罗鸣 夏先明 YANG Jin;HE Kai;ZHANG Mengyu;WU Lile;QIN Shu;FENG Chunhong;LUO Ming;XIA Xianming

作者机构：西南医科大学附属医院肝胆外科四川泸州646000 

出 版 物：《中国肿瘤生物治疗杂志》 (Chinese Journal of Cancer Biotherapy)

年 卷 期：2020年第27卷第3期

页      面：248-254页

学科分类：0710[理学-生物学] 1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 1002[医学-临床医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：四川省卫生和计划生育委员会科研资助项目(No.16PJ149) 

主　　题：miR-377-5p 缺氧诱导因子-1α 肝细胞癌 HepG2细胞 增殖 侵袭 上皮间质转化 

摘      要：目的:探讨miR-377-5p与缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1,HIF-1α)的靶向关系以及通过控血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)信号通路对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)细胞增殖、侵袭和EMT的调控作用。方法:qPCR检测35例人HCC组织及癌旁组织标本中miR-377-5p的表达水平。将HepG2细胞分为对照组、mimic NC组、miR-377-5p mimic组,qPCR检测转染效率;EdU染色、Transwell和Western blotting(WB)检测miR-377-5p过表达对HepG2细胞增殖、侵袭及其增殖相关蛋白Ki-67、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)及上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)标志蛋白E-cadherin、N-cadherin表达的影响;qPCR、WB检测miR-377-5p过表达对HepG2细胞中,缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)表达的影响。荧光素酶报告基因实验验证miR-377-5p与HIF-1α基因的靶向关系。结果:HCC组织中miR-377-5p表达水平较癌旁组织降低(P0.01)。与对照组相比,miR-377-5p mimic组HepG2细胞中miR-377-5p水平明显升高,细胞的增殖、侵袭能力降低(均P0.01),EMT、N-cadherin表达水平降低(均P0.01)而E-cadherin表达水平显著升高(P0.01);miR-377-5p mimic组中HIF-1αmRNA和蛋白表达水平均降低(P0.01或P0.05)。miR-377-5p靶向抑制HIF-1α基因表达,并抑制VEGF通路的激活(均P0.05)。结论:miR-377-5p通过靶向抑制HIF-1α基因表达和下调VEGF信号通路从而抑制HepG2细胞的增殖、侵袭和EMT。