hIL-15成熟肽段基因的克隆及其原核表达载体的构建
Cloning of Human Interleukin15 Gene and Construction of Prokaryotic Expression Vector作者机构:第四军医大学生物化学与分子生物学教研室 中国人民解放军传染病中心
出 版 物:《上海免疫学杂志》 (Shanghai Journal of Immunology)
年 卷 期:1999年第19卷第1期
页 面:24-26页
学科分类:1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 10[医学]
主 题:hIL-15 RT-PCR 分子克隆 原核表达 活性测定
摘 要:本文采用RTPCR的方法自成人脾脏中扩增出hIL15成熟肽段基因,定向克隆入pUC19中,筛选带有插段的阳性克隆。经序列测定证实后,插入大肠杆菌融合表达载体pGEX4T1中,构建重组表达质粒pGIL15。SDSPAGE证实pGIL15大肠杆菌中可表达分子量为386kD的融合蛋白带,表达量约占菌体总蛋白的185%。目的蛋白经纯化后具有促进靶细胞DNA合成的作用。