Taq Man实时荧光定量PCR检测猪伪狂犬病病毒方法的建立与初步应用

作     者：赵丽 崔保安 陈红英 魏战勇 赵玉丛 ZHAO Li;CUI Bao-an;CHEN Hong-ying;WEI Zhan-yong;ZHAO Yu-cong

作者机构：郑州牧业工程高等专科学校河南郑州450011 河南农业大学牧医工程学院河南郑州450002 

出 版 物：《中国预防兽医学报》 (Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine)

年 卷 期：2009年第31卷第2期

页      面：137-140,164页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：河南省杰出人才创新基金项目(0621002100) 

主　　题：实时荧光定量 Taq Man PCR 检测 猪伪狂犬病病毒 

摘      要：根据猪伪狂犬病病毒gE基因保守序列,设计合成引物和探针,优化反应条件,建立实时定量荧光PCR方法。实验结果表明,当50pmol/L的引物0.3μL和5pmol/L的探针0.5μL时,反应体系获得的CT值较小,而荧光强度增加值最大;制作的标准曲线显示各浓度范围内具有良好的线性关系;可检测到相当于20拷贝/μL的病毒DNA;与猪细小病毒、圆环病毒和猪瘟病毒等不发生交叉反应;敏感性比常规PCR电泳检测高约100倍。该方法具有快速、特异、敏感、可定量,并可同时检测大量样品等优点。