检索结果-南通市图书馆

中华检验医学杂志 2007年第10期30卷 1162-1163页

作者：陈丹潘世扬张丽霞高丽谢而付黄珮珺戎国栋南京医科大学第一附属医院临床检验中心 210029

循环DNA主要存在于人血浆和血清等体液中，在多种人类疾病中含量升高，具有临床诊断意义和预后判断价值。本研究以人工重组质粒DNA为内参照物，建立双重实时荧光定量PCR检测方法，对健康人血浆和血清DNA含量进行定量测定。

关键词：荧光定量PCR在 DNA检测血液循环重组质粒DNA PCR检测方法健康人血浆实时荧光定量循环DNA

实时荧光定量PCR检测结直肠癌hPTTG1的表达及其意义

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癌症 2008年第11期27卷 1217-1221页

作者：吴斌文马东李东风李友佳邓罡曾志刚张凯军张瑛华耿庆山广东省人民医院东病区消化内科广东广州510080 广东省人民医院肿瘤中心肿瘤内科广东广州510080 广东省人民医院医学实验中心广东广州510080

背景与目的:虽然人垂体瘤转化基因1(human pituitary-tumor transforming gene1,hPTTG1)在结直肠癌等恶性肿瘤中高表达,然而hPTTG1 mRNA与结直肠癌临床病理参数之间的关系及其能否作为结直肠癌诊断和预后判断的分子标志尚不清楚。本研... 详细信息

背景与目的:虽然人垂体瘤转化基因1(human pituitary-tumor transforming gene1,hPTTG1)在结直肠癌等恶性肿瘤中高表达,然而hPTTG1 mRNA与结直肠癌临床病理参数之间的关系及其能否作为结直肠癌诊断和预后判断的分子标志尚不清楚。本研究检测hPTTG1 mRNA在结直肠癌中的表达,分析其与临床病理参数之间的关系,探讨hPTTG1 mRNA作为结直肠癌诊断和转移复发的分子标志的可能性。方法:采用实时荧光定量PCR检测结直肠癌组织与对应癌旁组织hPTTG1 mRNA,并分析其与临床病理指标的关系。结果:结直肠癌组织hPTTG1mRNA表达较正常癌旁组织显著增高(0.42±0.07vs.0.03±0.01,P5ng/mL较0.05)。结论:hPTTG1 mRNA在结直肠癌中高表达,与结直肠癌的疾病进展密切相关,有助于对患者病情进展的预测。

关键词：结直肠肿瘤人垂体瘤转化基因1 实时荧光定量 PCR

实时荧光定量PCR用于玉米中黄曲霉的快速检测

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河南工业大学学报（自然科学版） 2024年第3期45卷 110-117页

作者：徐嵩月赵金凤赵锦琦李梦瑶张玉荣张咚咚河南工业大学粮食和物资储备学院粮食储藏与安全教育部工程研究中心河南郑州450001 杭州市粮食收储有限公司浙江杭州311100

黄曲霉的快速精确检测,既有利于预防真菌对粮食造成污染,也有利于控制粮食中真菌毒素的产生,确保粮食储藏安全。依据特异性邻甲基转移酶基因(OMT-1)设计了黄曲霉特异性引物,构建基于SYBR Green I实时荧光定量PCR(quantitative real-time... 详细信息

黄曲霉的快速精确检测,既有利于预防真菌对粮食造成污染,也有利于控制粮食中真菌毒素的产生,确保粮食储藏安全。依据特异性邻甲基转移酶基因(OMT-1)设计了黄曲霉特异性引物,构建基于SYBR Green I实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)的检测体系,建立了黄曲霉毒素产生菌OMT-1基因拷贝数与循环阈值(cycle threshold,CT)之间的线性关系,对黄曲霉qPCR绝对定量方法进行验证。研究结果表明:该方法特异性强,检测灵敏度高,检测限为0.015μg/mL,OMT-1基因拷贝数的对数与CT线性相关,标准曲线方程为y=-3.5192x+55.905(R^(2)=0.9973),扩增效率为107.0%。OMT-1基因的拷贝数与同一组样本获取的菌落总数相关性高(R^(2)=0.97)。所建立的qPCR绝对定量方法可用于监测玉米中黄曲霉基因的表达。

关键词：实时荧光定量黄曲霉检测玉米

实时荧光定量反转录聚合酶链反应检测HLA-DRα基因mRNA表达

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免疫学杂志 2006年第3期22卷 341-344页

作者：宁勇王宇学陶建武湖北中医学院检验系武汉430064

目的建立实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测HLA-DRα基因mRNA表达。方法应用T-A克隆技术构建含HLA-DRα基因的载体作为标准模板,采用荧光Taqman方法及探针标记技术,建立实时荧光定量RT-PCR方法,制备标准曲线,检测牛膝多糖(A... 详细信息

目的建立实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测HLA-DRα基因mRNA表达。方法应用T-A克隆技术构建含HLA-DRα基因的载体作为标准模板,采用荧光Taqman方法及探针标记技术,建立实时荧光定量RT-PCR方法,制备标准曲线,检测牛膝多糖(ABPS)诱导人外周血单核细胞的HLA-DRαmRNA表达水平变化,并与半定量RT-PCR检测结果进行比较。结果实时荧光定量RT-PCR检测ABPS诱导人外周血单核细胞实验组HLA-DRαmRNA表达明显升高,而无ABPS诱导人外周血单核细胞对照组HLA-DRαmRNA表达没有改变,且半定量RT-PCR结果显示HLA-DRα出现类似的变化趋势。结论所建立的实时荧光定量RT-PCR用于检测HLA-DRαmRNA表达,结果用拷贝数表示,比半定量RT-PCR更灵敏、准确。

关键词：实时荧光定量反转录聚合酶链反应 HLA-DRα基因

实时荧光定量聚合酶链反应技术在产前诊断唐氏综合征中的应用

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中华妇产科杂志 2004年第10期39卷 678-681页

作者：郑明明胡娅莉许争峰王志群史婷琦叶晓东崔恒宓南京大学医学院附属鼔楼医院妇产科 210008

目的探讨实时荧光定量PCR技术用于产前诊断唐氏综合征的可行性。方法采用实时荧光定量PCR法,分别检测85例唐氏综合征高风险的中期妊娠妇女的羊水和7例智残儿外周血标本中,21号染色体上特异区域基因片段(DSCR3)和管家基因片段(GAPDH),并... 详细信息

目的探讨实时荧光定量PCR技术用于产前诊断唐氏综合征的可行性。方法采用实时荧光定量PCR法,分别检测85例唐氏综合征高风险的中期妊娠妇女的羊水和7例智残儿外周血标本中,21号染色体上特异区域基因片段(DSCR3)和管家基因片段(GAPDH),并计算两者的比值。同时采用细胞遗传学方法分析其染色体核型。结果80例羊水细胞DNA检测DSCR3/GAPDH比值在046～130之间,染色体核型全部正常;而另5例羊水细胞和7例智残儿外周血DSCR3/GAPDH比值明显升高,达164～198,染色体核型均为21三体。5例中有3例核型为47,XY,+21;1例核型为47,XX,+21;另1例为易位型[46,XY,-15,+t(15;21)]。7例智残儿中4例为47,XY+21;3例为47,XX+21。结论实时荧光定量PCR技术可作为产前快速准确诊断唐氏综合征的有效方法。

关键词：唐氏综合征智残染色体核型产前诊断实时荧光定量羊水细胞比值 GAPDH 21号染色体聚合酶链反应技术

实时荧光定量检测HCV RNA含量的临床意义

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世界华人消化杂志 2005年第1期13卷 39-43页

作者：张冬雷施健崔之础王惠民鞠少卿李立人倪红兵苏建友南通大学附属医院酶学研究室江苏省南通市226001 南通大学附属医院检验医学中心江苏省南通市226001 南通大学附属医院消化内科江苏省南通市226001

目的:建立实时荧光定量RT-PCR(RFQ-RT-PCR)检测HCV RNA含量的方法,初步探讨HCV RNA含量变化与病情的相关性. 方法:HCV抗体阳性样本80例,包括慢性肝炎(CH) 39例,肝硬化(LC)23例,肝癌(HCC)18例,献血员样本40例为正常对照.在HCV基因组5’... 详细信息

目的:建立实时荧光定量RT-PCR(RFQ-RT-PCR)检测HCV RNA含量的方法,初步探讨HCV RNA含量变化与病情的相关性. 方法:HCV抗体阳性样本80例,包括慢性肝炎(CH) 39例,肝硬化(LC)23例,肝癌(HCC)18例,献血员样本40例为正常对照.在HCV基因组5’非编码区(5’UTR)设计特异性引物和一对杂交探针,构建相应基因片段载体,体外转录RNA作为标准品,根据其建立的标准曲线对血清HCV RNA进行定量,同时用传统的套式RT-PCR进行定性分析. 结果:本法检测HCV RNA含量的线性范围为1012-104copies/L,批内和批间重复性测定的v分别为1.68-5.97%和6.40-10.58%.在HCV抗体阳性患者中, 肝硬化和肝癌患者的HCV RNA含量显著高于慢性肝炎患者(7.75±0.29,7.86±0.32 vs 4.67±0.41,P<0.05), 而且HCV RNA含量与ALT水平呈正相关(r=0.89, t=8.29,P<0.05). 结论:RFQ-RT-PCR检测HCV RNA含量具有较好的灵敏度和特异性,其含量与丙型肝炎患者的病情变化及严重程度有一定相关性.

关键词： HCV抗体 RNA 含量实时荧光定量患者阳性慢性肝炎 RT—PCR 基因组体外转录

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实时荧光定量PCR应用及实验条件优化

大连医科大学学报 2007年第4期29卷 404-407页

作者：丁超李惠民云南省第二人民医院血液科云南昆明650031

实时荧光定量PCR是在普通PCR基础上发展起来的新技术,在保持了PCR技术灵敏、快速、特异特点的基础上增加了定量的特点。在检测微小残留病变,肿瘤标志性基因及病毒负荷量等方面为临床医生判断病情,了解预后发挥着不可替代的作用。荧光定... 详细信息

实时荧光定量PCR是在普通PCR基础上发展起来的新技术,在保持了PCR技术灵敏、快速、特异特点的基础上增加了定量的特点。在检测微小残留病变,肿瘤标志性基因及病毒负荷量等方面为临床医生判断病情,了解预后发挥着不可替代的作用。荧光定量PCR为科学发挥着巨大作用的同时,人们也不断对其实验条件进行优化,保证定量结果的准确。

关键词：实时荧光定量 PCR 优化

实时荧光定量测定人B细胞激活因子受体基因表达水平

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中华检验医学杂志 2005年第3期28卷 299-301页

作者：鞠少卿张冬雷倪红兵王跃国苏建友施健王惠民孔宪涛仲人前第二军医大学长征医院实验诊断科全军临床免疫中心上海200003 南通大学附属医院酶学研究室南通大学附属医院检验医学中心

目的研究建立实时荧光定量聚合酶链反应(RFQ-PCR)检测人B细胞激活因子受体(BAFF-R)含量的方法,及探讨其在外周血单个核细胞(PBMC)中BAFF-R mRNA表达的检测价值.方法在BAFF-R基因高保守区设计特异性引物和荧光探针,用逆转录(RT-PCR)扩增... 详细信息

目的研究建立实时荧光定量聚合酶链反应(RFQ-PCR)检测人B细胞激活因子受体(BAFF-R)含量的方法,及探讨其在外周血单个核细胞(PBMC)中BAFF-R mRNA表达的检测价值.方法在BAFF-R基因高保守区设计特异性引物和荧光探针,用逆转录(RT-PCR)扩增目的片段实时检测产物的荧光强度,根据标准品建立标准曲线,由软件自动计算出待测样本中BAFF-R mRNA含量,并以 BAFF-R mRNA和β2M mRNA含量的比值进行BAFF-R表达水平评价.结果 RFQ -PCR检测BAFF-R含量的线性范围为109 ～101 pg/ml,低浓度样本批内和批间变异系数(CV)分别为12.5%和11.9%,高浓度样本批内和批间CV分别为8.3%和9.3%.30名健康献血员样本的PBMC中,83%(25/30)有BAFF-R mRNA表达,范围为0.14～1.03.结论 RFQ -PCR检测BAFF-R mRNA含量的方法,具有较好的检测灵敏度和重复性.

关键词：实时荧光定量含量 B细胞表达水平 mRNA表达 PBMC 激活因子 PCR) 荧光探针 R基因

实时荧光定量PCR检测鸟苷酰环化酶C基因表达方法的建立

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临床检验杂志 2006年第3期24卷 176-178页

作者：毛振彪张冬雷黄介飞王唯一鞠少卿南通大学附属医院消化内科江苏南通226001 南通大学附属医院检验医学中心江苏南通226001

目的建立实时荧光定量PCR(RFQ-PCR)检测鸟苷酰环化酶C(GC-C)基因表达的方法。方法在GC-C基因高保守区设计了特异性的引物和探针,RT-PCR扩增目的片段并实时检测产物的荧光强度,根据标准品建立标准曲线,由软件自动计算出待测样本中GC-C m... 详细信息

目的建立实时荧光定量PCR(RFQ-PCR)检测鸟苷酰环化酶C(GC-C)基因表达的方法。方法在GC-C基因高保守区设计了特异性的引物和探针,RT-PCR扩增目的片段并实时检测产物的荧光强度,根据标准品建立标准曲线,由软件自动计算出待测样本中GC-C mRNA含量,并以GC-C mRNA和β2M mRNA含量的比值作为评价GC-C表达水平的指标。结果本法检测GC-C mRNA含量的线性范围为101pg／ml-109pg／ml,样本批内和批间CV值分别为6．87％一11．12％和8．86％- 15．19％。30例健康献血员和11例大肠良性病变患者的外周血单个核细胞(PBMC)中均未检出GC-C mRNA表达,大肠癌患者PBMC的GC-C mRNA检出率为83．8％(31／37),表达水平为0．88±0．06。10例大肠癌组织和T84细胞株均检出GC-C mRNA,表达水平分别为每μg组织(0．86±0．07)和每个细胞0．0082。结论成功建立RFQ-PCR检测GC-C mRNA含量的方法,具有较好的检测灵敏度、特异性和可重复性。

关键词：鸟苷酰环化酶C 外周血单个核细胞实时荧光定量

实时荧光定量PCR检测大肠癌患者外周血鸟苷酰环化酶C基因及其临床意义

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第二军医大学学报 2005年第11期26卷 1252-1255页

作者：毛振彪王唯一张冬雷黄介飞鞠少卿南通大学附属医院消化内科南通226001 南通大学附属医院检验医学中心南通226001

目的:建立人鸟苷酰环化酶C(GC-C)含量实时荧光定量PCR(RFQ-PCR)检测的新方法,观察大肠癌患者外周血单个核细胞(PBMC)GC-C mRNA表达水平并探讨其临床意义.方法:在GC-C基因高保守区设计了特异性的引物和探针,RT-PCR扩增目的片段并实时检... 详细信息

目的:建立人鸟苷酰环化酶C(GC-C)含量实时荧光定量PCR(RFQ-PCR)检测的新方法,观察大肠癌患者外周血单个核细胞(PBMC)GC-C mRNA表达水平并探讨其临床意义.方法:在GC-C基因高保守区设计了特异性的引物和探针,RT-PCR扩增目的片段并实时检测产物的荧光强度,根据标准品建立的标准曲线,由软件自动计算出待测样本(30例健康献血员、11例大肠良性病变和37 例大肠癌)中GC-C mRNA准确含量,并以GC-C mRNA和β2微球蛋白 mRNA含量的比值作为评价GC-C表达水平的指标.结果:本法检测GC-C mRNA含量的线性范围为101 ～109 pg/ml,样本批内和批间变异系数(CV)值分别为6.87%～11.12%和8.86%～15.19%.30例健康献血员和11例大肠良性病变样本的PBMC中均未检出GC-C mRNA表达,大肠癌患者外周血GC-C mRNA的检出率为83.8%(31/37).大肠癌患者外周血PBMC GC-C mRNA表达水平为0.88±0.06,与Duke分期、淋巴结转移和肝转移密切相关,与年龄、性别、肿瘤大小等无关.结论:GC-C mRNA RFQ-PCR检测外周血大肠癌细胞具有较好的检测灵敏度、特异性和重复性,GC-C mRNA表达水平可能对指导大肠癌Duke分期、判断淋巴结转移和肝转移、指导术后综合治疗均有一定价值.

关键词：鸟苷酰环化酶C 结直肠肿瘤外周血单个核细胞实时荧光定量逆转录聚合酶链反应