实时荧光定量PCR用于玉米中黄曲霉的快速检测

作     者：徐嵩月 赵金凤 赵锦琦 李梦瑶 张玉荣 张咚咚 XU Songyue;ZHAO Jinfeng;ZHAO Jinqi;LI Mengyao;ZHANG Yurong;ZHANG Dongdong

作者机构：河南工业大学粮食和物资储备学院粮食储藏与安全教育部工程研究中心河南郑州450001 杭州市粮食收储有限公司浙江杭州311100 

出 版 物：《河南工业大学学报（自然科学版）》 (Journal of Henan University of Technology：Natural Science Edition)

年 卷 期：2024年第45卷第3期

页      面：110-117页

学科分类：0832[工学-食品科学与工程（可授工学、农学学位）] 08[工学] 083202[工学-粮食、油脂及植物蛋白工程] 

基　　金：国家自然科学基金项目(32001745) 中国科协第五届青年人才托举工程项目(2019QNRC001) 国家小麦产业技术体系项目(CARS-03) 河南省级科技研发计划联合基金(应用攻关类)项目(222103810081) 

主　　题：实时荧光定量 黄曲霉 检测 玉米 

摘      要：黄曲霉的快速精确检测,既有利于预防真菌对粮食造成污染,也有利于控制粮食中真菌毒素的产生,确保粮食储藏安全。依据特异性邻甲基转移酶基因(OMT-1)设计了黄曲霉特异性引物,构建基于SYBR Green I实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)的检测体系,建立了黄曲霉毒素产生菌OMT-1基因拷贝数与循环阈值(cycle threshold,CT)之间的线性关系,对黄曲霉qPCR绝对定量方法进行验证。研究结果表明:该方法特异性强,检测灵敏度高,检测限为0.015μg/mL,OMT-1基因拷贝数的对数与CT线性相关,标准曲线方程为y=-3.5192x+55.905(R^(2)=0.9973),扩增效率为107.0%。OMT-1基因的拷贝数与同一组样本获取的菌落总数相关性高(R^(2)=0.97)。所建立的qPCR绝对定量方法可用于监测玉米中黄曲霉基因的表达。