非酯化脂肪酸对原代培养犊牛肝细胞胰岛素信号通路的影响

作     者：杜希良 王亚洲 杨宇宸 赵志波 刘欢 张世奇 王哲 李心慰 刘国文 

作者机构：吉林大学动物医学学院吉林长春130062 

出 版 物：《中国兽医学报》 (Chinese Journal of Veterinary Science)

年 卷 期：2016年第36卷第3期

页      面：508-512页

学科分类：090603[农学-临床兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(31372494 31402265 31472247 31460681) 

主　　题：NEFAs SIRT1 胰岛素信号通路 肝细胞 犊牛 

摘      要：旨在探讨非酯化脂肪酸(nonestesterified fatty acids,NEFAs)对体外原代培养犊牛肝细胞胰岛素信号通路的影响及SIRT1在其中的调控作用。选择培养48h的原代犊牛肝细胞,添加不同浓度的NEFAs(0、0.6、1.2、1.8mmol/L),继续培养12h,胰岛素处理组在收样前用100nmol/L胰岛素处理30min,每个浓度3个重复。另外选取已培养48h的细胞,用SIRT1抑制剂Nicotinamide(10mmol/L)处理12h,胰岛素处理组在收样前用100 mmol/L胰岛素处理30min。运用免疫印迹Western blot方法,检测NEFAs和Nicotinamide对肝细胞胰岛素信号通路关键蛋白IR和Akt的磷酸化水平及SIRT1蛋白表达水平的影响。结果显示,与对照组相比,1.2、1.8 mmol/L NEFAs组胰岛素刺激的IR磷酸化水平显著降低(P0.01),而Akt的磷酸化程度在NEFAs浓度为0.6 mmol/L时即显著降低(P0.01),同时,SIRT1的蛋白表达水平在NEFAs为1.2、1.8mmol/L显著降低(P0.01);添加SIRT1抑制剂显著降低SIRT1的蛋白表达水平(P0.01),同时胰岛素刺激的Akt磷酸化水平也显著降低(P0.01)。结果表明,高浓度的NEFAs可以损伤体外原代培养肝细胞的胰岛素信号通路,SIRT1在NEFAs损伤的胰岛素信号通路中发挥重要作用。