过表达核心蛋白聚糖基因对胆管癌细胞周期及凋亡的影响

作     者：王伟林 余翔 李泉 毛永欢 沈佳佳 骆霞岗 闻浩 喻春钊 Wang Weilin;Yu Xiang;Li Quan;Mao Yonghuan;Shen Jiajia;Luo Xiagang;Wen Hao;Yu Chunzhao

作者机构：南京医科大学第二附属医院普外科210011 

出 版 物：《中华实验外科杂志》 (Chinese Journal of Experimental Surgery)

年 卷 期：2015年第32卷第1期

页      面：69-71页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30972910、81172269) 中国博士后一等基金资助项目(20060390294) 江苏省自然科学基金资助项目(BIC2011858) 江苏省六大人才高峰基金资助项目(WSW-032) 

主　　题：胆管癌 核心蛋白聚糖 细胞周期 脱噬作用 

摘      要：目的 观察过表达核心蛋白聚糖（DCN）基因对胆管癌细胞周期及凋亡的影响.方法 脂质体介导真核表达质粒pEGFP-DCN和空载体pEGFP-N1转入人胆管癌细胞株QBC939,Westernblot检测DCN蛋白的表达,实时定量反转录-聚合酶链反应（RT-qPCR）检测DCN mRNA的表达,克隆形成实验计算克隆形成率,噻唑蓝（MTT）法检测细胞增殖活力,流式细胞术检测细胞周期及凋亡.结果 RT-qPCR示过表达DCN相对空载体上调32.34倍;Western blot结果示过表达组DCN上调2.00倍.pEGFP-DCN转染组细胞克隆形成数[（210.9±19.3）个]显著低于空质粒转染组[（608.7±56.3）个],差异有统计学意义（P0.05）.转染pEGFP-DCN细胞与空载体比较,细胞增殖能力显著降低,差异有统计学意义（P0.05）.流式细胞周期检测显示,胆管癌细胞转染pEGFP-DCN后G1～ Go期细胞比例明显升高,而G2～S期细胞减少,细胞周期被阻滞在G1～Go期,凋亡分析转染pEGFP-DCN的QBC939细胞较转染空载体细胞凋亡显著增加,半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）-3明显增高,而B细胞淋巴瘤/白血病-2（bcl-2）的表达水平明显降低（0.787±0.068比1.276±0.157）.结论 转染DCN能够显著抑制胆管癌细胞的增殖,明显促进胆管癌细胞凋亡,而DCN促进胆管细胞凋亡与上调Caspase-3和下调bcl-2蛋白相关.