检索结果-南通市图书馆

血管内皮生长因子对乙醇诱发大鼠肝窦内皮细胞凋亡的作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华医学杂志 2007年第44期87卷 3138-3142页

作者：张燕军许乐王秀娣石蕾王琢非北京医院消化内科 100730

目的研究乙醇引起肝窦内皮细胞(SEC)死亡的类型和血管内皮生长因子(VEGF)对这种死亡的作用,以及涉及 Ets-1和半胱氨酸蛋白水解酶(Caspase)-8的作用机制。方法按照 Braet等的方法并作改进,从 Wistar 雄性大鼠分离和培养 SEC。然后,将 SEC... 详细信息

目的研究乙醇引起肝窦内皮细胞(SEC)死亡的类型和血管内皮生长因子(VEGF)对这种死亡的作用,以及涉及 Ets-1和半胱氨酸蛋白水解酶(Caspase)-8的作用机制。方法按照 Braet等的方法并作改进,从 Wistar 雄性大鼠分离和培养 SEC。然后,将 SEC 与乙醇(25～100 mmol/L)和VEGF(20～30 ng/ml)共同孵育6 h,采用缺口末端标记(TUNEL)技术检测 SEC 凋亡。以 Western 印迹法测定 Ets-1蛋白表达和 FLICE/Caspase-8比色蛋白酶检测试剂盒测定 Caspase-8活性的变化。结果相差显微镜下,培养3 d 的SEC 呈纺锤状并基本融合。而与乙醇孵育的过程中 SEC 趋于皱缩和死亡。荧光显微镜下,对照 SEC 绝大多数呈 TUNEL 染色阴性;添加乙醇(100 mmol/L)2 h 后TUNEL 染色阳性细胞开始增加,6 h 后约75%细胞呈 TUNEL 染色阳性;并且,SEC 与乙醇(25～100 mmol/L)共同孵育6 h,TUNEL 染色阳性的 SEC 增加呈明显剂量依赖性关系(均 P<0.05)。VEGF(20～30 ng/ml)明显抑制100 mmol/L 的乙醇引起 SEC 凋亡,呈明显剂量依赖性关系(P<0.05);加入 VEGF(30 ng/ml)以后引起的 TUNEL 染色阳性细胞数只是单纯与乙醇孵育的71%(P<0.05)。加入100 mmol/L 乙醇培养6 h 后,SEC 的 Ets-1蛋白表达明显减少,VEGF(30 ng/ml)防止乙醇(100 mmol/L)引起 SEC 表达 Ets-1蛋白减少。SEC 与乙醇(100 mmol/L)孵育2 h 时 Caspase-8活性明显增加至44.9±14.3;VEGF(20和30 ng/ml)防止乙醇(100 mmol/L)引起 SEC 表达 Caspase-8活性增加(分别为30.4±2.0和25.2±2.2,均 P<0.05)。结论 VEGF 防止乙醇诱导的 SEC 凋亡,至少部分可能是通过抑制乙醇下调 SEC 表达 Ets-1蛋白和乙醇上调 Caspase-8活性表达。

关键词：肝脱噬作用内皮生长因子 Ets-1 胱冬酶-8

微波对大鼠视觉功能及视网膜神经节细胞的损伤作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华劳动卫生职业病杂志 2012年第3期30卷 172-177页

作者：魏爱民杨学森王源何根林周舟张广斌余争平第三军医大学电磁辐射生物效应与医学防护教育部重点实验室重庆400038 北京军区空军后勤部卫生处

目的探讨微波辐照后大鼠视觉功能及视网膜神经节细胞（RGCs）凋亡的变化以及二者之间的关系。方法采用视网膜电流图（ERG）和闪光视觉诱发电位（F-VEP）观察微波对大鼠视觉功能的影响，采用TdT介导的dUTP缺口末端标记技术（TUNEL）染色... 详细信息

目的探讨微波辐照后大鼠视觉功能及视网膜神经节细胞（RGCs）凋亡的变化以及二者之间的关系。方法采用视网膜电流图（ERG）和闪光视觉诱发电位（F-VEP）观察微波对大鼠视觉功能的影响，采用TdT介导的dUTP缺口末端标记技术（TUNEL）染色和Hoechst染色分别观察微波辐照后大鼠视网膜和离体培养的神经节细胞的凋亡情况。结果微波辐照后ERG-a波无明显变化，ERG-b波的峰值在第3天和第7天时较对照组明显降低，而ERG-b波潜伏期仅在第3天时明显降低，差异均有统计学意义（P〈0.01）。F-vEP潜伏期在第3天后明显增加，与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；7d后恢复。而峰值在辐照后第3天和第7天时均明显降低，与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。微波辐照后12h，大鼠视网膜节细胞层细胞凋亡率从2．85％增加至6．73％；直至7d后仍维持较高凋亡率（8．93％），差异有统计学意义（P〈0．05）。离体培养的RGCs在微波辐照后6h开始细胞凋亡率从8．42％明显增加至13．91％，差异有统计学意义（P〈0．05）；持续到辐照后24h，并达到凋亡高峰（24．14％）。结论微波辐照能够导致大鼠视网膜视功能损伤，而微波诱导RGCs凋亡增加可能是视觉功能障碍的主要病理基础之一。

关键词：微波视觉视网膜神经节细胞脱噬作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

骨形成蛋白在低氧性肺动脉高压发病中的作用

中华结核和呼吸杂志 2007年第9期30卷 662-666页

作者：杨莹程德云樊莉莉杨艳娟穆茂陈文彬四川大学华西医院呼吸科成都610041

目的观察低氧性肺动脉高压大鼠肺组织中骨形成蛋白2(BMP-2)的变化及 BMP 在低氧诱导内皮细胞凋亡中的作用,探讨 BMP 在低氧性肺动脉高压发病中的作用。方法将20只雄性 Wistar 大鼠随机分为2组,低氧组经常压低氧处理3周,建立大鼠低氧性... 详细信息

目的观察低氧性肺动脉高压大鼠肺组织中骨形成蛋白2(BMP-2)的变化及 BMP 在低氧诱导内皮细胞凋亡中的作用,探讨 BMP 在低氧性肺动脉高压发病中的作用。方法将20只雄性 Wistar 大鼠随机分为2组,低氧组经常压低氧处理3周,建立大鼠低氧性肺动脉高压模型,采用免疫组织化学染色法观察大鼠肺组织中 BMP-2的表达。用图像分析技术检测大鼠肺小动脉形态改变及 BMP-2表达强度的变化。建立人脐静脉内皮细胞(HUVEC)低氧培养模型,加入 BMP 阻断剂Noggin,用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果低氧3周后,大鼠平均肺动脉压(mPAP)为(29.5±0.9)mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa),与对照组的(16.3±0.5)mm Hg 比较明显增加;低氧大鼠肺小动脉管壁增厚、管腔狭窄,表现为管壁厚度占外径的百分比(WT%)和管壁面积占血管总面积的百分比(WA%)明显升高,分别为(27±7)%和(80±8)%,对照组分别为(16±5)%和(54±11)%,两组相比差异有统计学意义(P作用。

关键词：低氧血高血压,肺性脱噬作用骨形成蛋白

丁酸钠对Hep-2细胞的生长抑制和诱导凋亡作用及其对端粒酶活性的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2007年第1期42卷 58-63页

作者：高岭董明敏曹华程秀莲郑州大学第一附属医院耳鼻咽喉科 450052

目的研究丁酸钠对 Hep-2细胞的生长抑制和诱导凋亡作用及诱导凋亡过程中对端粒酶活性的影响。方法采用四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl terazolium,MTT)比色法观察不同浓度丁酸钠对 Hep-2细胞的生长抑制作用,透射电镜下观察其形态学变... 详细信息

目的研究丁酸钠对 Hep-2细胞的生长抑制和诱导凋亡作用及诱导凋亡过程中对端粒酶活性的影响。方法采用四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl terazolium,MTT)比色法观察不同浓度丁酸钠对 Hep-2细胞的生长抑制作用,透射电镜下观察其形态学变化,未端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP 缺口末端标记(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick-end-labeling,TUNEL)法、琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测丁酸钠作用后的细胞凋亡情况及细胞周期变化,端粒重复序列扩增(telomeric repeat amplification protocal,TRAP)-银染法检测端粒酶活性变化,RT-PCR 分析端粒酶各组分的 mRNA 表达情况。结果丁酸钠对 Hep-2细胞的生长抑制作用呈时间和剂量依赖性。透射电镜下可见典型的凋亡细胞形态学改变。琼脂糖凝胶电泳可见特征性的凋亡细胞 DNA 梯状条带。TUNEL 法显示,2.5 mmol/L 丁酸钠作用72 h,细胞凋亡指数由作用前的2.27±1.18增加至33.50±2.75。流式细胞仪显示,2.5 mmol/L 丁酸钠作用72h,细胞凋亡率由作用前的2.86%增加至31.28%,G0/G1期细胞比例由50.38%增加至70.88%,S 期细胞比例由 27.40%减少至8.20%,细胞增殖指数由49.62%降低至29.12%。TRAP-银染法显示,丁酸钠作用后细胞端粒酶活性下降,且具有一定时间效应关系。RT-PCR 显示端粒酶逆转录酶表达下降而端粒酶 RNA 模板和端粒酶相关蛋白表达无明显改变。结论丁酸钠对 Hep-2细胞具有生长抑制和诱导凋亡作用,并可能通过下调端粒酶逆转录酶表达而抑制端粒酶活性。

关键词：喉肿瘤细胞系脱噬作用丁酸钠

环孢素A对正常早孕期细胞滋养细胞体外生长的调节作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华妇产科杂志 2002年第2期37卷 74-76,I001页

作者：闫凤亭李大金孙晓溪朱影王明雁孟毅余江复旦大学医学院附属妇产科研究所生殖免疫研究室福州军区福州总医院妇产科

目的　探讨环孢素A(cyclosporinA ,CsA)对正常早孕期细胞滋养细胞生长的调节作用。方法　选择孕 6～ 8周行人工流产术妇女绒毛 ,应用硅化聚乙酰胺吡咯烷酮 (percoll)密度梯度离心法 ,分离细胞滋养细胞 ;采用氚标记胸腺嘧啶摄入法 ,评价... 详细信息

目的　探讨环孢素A(cyclosporinA ,CsA)对正常早孕期细胞滋养细胞生长的调节作用。方法　选择孕 6～ 8周行人工流产术妇女绒毛 ,应用硅化聚乙酰胺吡咯烷酮 (percoll)密度梯度离心法 ,分离细胞滋养细胞 ;采用氚标记胸腺嘧啶摄入法 ,评价细胞滋养细胞的增殖能力 ;流式细胞仪分析其细胞周期 ;并应用扫描电子显微镜观察其细胞形态。结果　 (1)CsA在有效剂量范围内 (1× 10 -4 ～ 1μmol/L)可刺激细胞滋养细胞增殖 ,当细胞培养液中CsA浓度为 10 μmol/L时 ,则显著抑制细胞滋养细胞增殖。 (2 )细胞滋养细胞在浓度为 1μmol/LCsA培养液中培养 2 4h时 ,G2 M期细胞从 (2 8± 0 5 ) %增至 (6 7± 1 3) % ,当培养 48h时 ,则S期细胞从 (14± 5 ) %增至 (2 8± 8) %、凋亡细胞从 (8 7± 2 2 ) %减至 (3 6± 1 0 ) %。 (3)在浓度为 1μmol/LCsA培养液中培养 48h可使细胞滋养细胞伪足增多、变长 ,提示细胞侵袭力增加 ;细胞培养液中CsA浓度为 10 μmol/L时伪足减少。结论　CsA在有效剂量范围内可刺激早孕期细胞滋养细胞生长 ,细胞形态改变 ,侵袭力增加。

关键词：环孢霉素滋养层细胞分裂脱噬作用

参附注射液对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤干预作用的实验研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华医学杂志 2006年第42期86卷 2994-2997页

作者：王军杨丽娟周长美朱红梅张绍美徐州医学院附属医院新生儿科 221002 徐州医学院附属医院中医科 221002

目的研究参附注射液对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)的干预作用。方法建立新生大鼠HIBD模型,把实验分成两部分(1)观察缺氧缺血后3、7、14和28d各组新生大鼠的体重变化以及各组28d内生存率。(2)流式细胞术测量缺氧缺血前2h,缺氧缺血后2... 详细信息

目的研究参附注射液对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)的干预作用。方法建立新生大鼠HIBD模型,把实验分成两部分(1)观察缺氧缺血后3、7、14和28d各组新生大鼠的体重变化以及各组28d内生存率。(2)流式细胞术测量缺氧缺血前2h,缺氧缺血后2h、12h、24h、3d、7d、14d和28d各时间点新生大鼠海马CA1区神经元的凋亡率,每组实验随机分为4组(每组20只)假手术组,生理盐水对照组,参附预处理组,参附治疗组。结果缺氧缺血后3、7、14和28d,生理盐水对照组大鼠体重的增长均明显小于假手术组(7d8.8g±2.1gvs14.0g±2.9g,均P0.05)。缺氧缺血后2h生理盐水对照组、参附治疗组、参附预处理组海马神经元凋亡率开始升高,于缺氧缺血后24h凋亡率达到峰值后开始下降,缺氧缺血后14d降到正常。参附治疗组和参附预处理组海马神经元凋亡情况明显好于生理盐水对照组(24h16.0%±4.2%vs11.9%±2.3%vs18.1%,P<0.05或P<0.01)。结论参附注射液减少了新生大鼠缺氧缺血后神经元凋亡的发生,改善了新生大鼠HIBD后的生长发育,提高了其生存率。

关键词：参附汤低氧-缺血脑脱噬作用体重

氟对大鼠脑细胞DNA的损伤及诱导凋亡的作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华预防医学杂志 2002年第4期36卷 222-224页

作者：陈军陈学敏杨克敌夏涛谢虹华中科技大学同济医学院环境卫生学教研室武汉430030

目的　探讨氟对大鼠脑细胞DNA的损伤作用及诱导凋亡的作用。方法　体内试验中 ,对照组大鼠腹腔注射蒸馏水 ,氟组大鼠注射氟化钠 ,染毒剂量为 2 0mg·kg- 1 ·d- 1 ;体外试验中 ,采用 5mmol/L氟化钠对急性分离的大脑神经细胞染毒 2h后用... 详细信息

目的　探讨氟对大鼠脑细胞DNA的损伤作用及诱导凋亡的作用。方法　体内试验中 ,对照组大鼠腹腔注射蒸馏水 ,氟组大鼠注射氟化钠 ,染毒剂量为 2 0mg·kg- 1 ·d- 1 ;体外试验中 ,采用 5mmol/L氟化钠对急性分离的大脑神经细胞染毒 2h后用单细胞凝胶电泳技术 (SCGE)研究氟对细胞DNA的损伤 (单链断裂 )。采用TUNEL法和流式细胞术 (FCM)检测细胞凋亡。结果　体内试验氟组大鼠大脑皮层神经细胞DNA损伤情况明显比对照组严重 ,Ridit值分别为 0 351和 0 639,体外试验对照组与氟组Ridit值分别为 0 650 1和 0 3844。TUNEL阳性细胞在氟组大鼠大脑皮层、海马及小脑颗粒细胞层均可见到 ,在对照组大鼠则很罕见。流式细胞术检测结果表明大脑皮层及海马神经细胞凋亡百分率氟组 (2 7 1 2± 3 0 8,34 97± 5 46)均高于对照组 (4 63± 0 98,5 35± 0 79) ,差异有极显著性意义。

关键词：氟化钠脑 DNA损伤脱噬作用流式细胞术

四环素调控表达的反义bcl-2对人神经母细胞瘤细胞系SK-N-MC生长和凋亡的作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华病理学杂志 2002年第2期31卷 135-139页

作者：关健陈杰赵和中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院病理科北京100730

目的　研究由四环素调控的反义bcl 2的表达对人神经母细胞瘤细胞系SK N MC细胞的生长和凋亡的作用并初步探讨其相关机制。方法　非定向克隆构建携带反义bcl 2cDNA片段的由四环素调控表达的真核细胞表达载体PUCCOMB1CMV/Asbcl 2 ;应用脂... 详细信息

目的　研究由四环素调控的反义bcl 2的表达对人神经母细胞瘤细胞系SK N MC细胞的生长和凋亡的作用并初步探讨其相关机制。方法　非定向克隆构建携带反义bcl 2cDNA片段的由四环素调控表达的真核细胞表达载体PUCCOMB1CMV/Asbcl 2 ;应用脂质体LipofectamineTM 介导转染SK N MC细胞 ,同时以空载体转染细胞作为对照。MTT法研究细胞的生长和增殖状况 ,提取DNA梯带和应用流式细胞术检测凋亡细胞。逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)研究细胞凋亡中bcl xL/bcl xS 基因在mRNA水平上表达的变化。Western杂交检测bcl 2及其上下游相关基因caspase 3、PARP的变化。结果　转染反义bcl 2的细胞生长增殖缓慢 ,在去血清培养的相同的时间内其凋亡细胞数也明显多于对照组细胞 ,提前出现DNA梯带。在细胞的凋亡过程中检测到非活性caspase 3酶原蛋白减少并检测到bcl 2、PARP蛋白的降解产物条带。但bcl xL/bcl xS 基因在mRNA水平上表达无明显改变。结论反义bcl 2mRNA可抑制SK N MC细胞的生长和增殖 ,促进去血清培养所诱导的SK N MC细胞的凋亡。在细胞凋亡过程中caspase 3被激活 ,bcl 2和PARP蛋白被裂解 ,但bcl xL/bcl xS 在反义bcl 2mRNA诱导的SK N MC细胞的凋亡过程中无变化。

关键词：四环素反义bcl-2 SK-N-MC 神经母细胞瘤脱噬作用 bcl-2基因肿瘤细胞培养细胞凋亡

凋亡蛋白Bax在肿瘤坏死因子凋亡诱导配体诱导恶性淋巴瘤细胞耐药中的调节作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华医学杂志 2007年第2期87卷 134-137页

作者：郝继辉俞鸣贾丽柳凤亭李强郝希山天津医科大学附属肿瘤医院腹部外科 30060

目的探讨凋亡蛋白 Bax 在恶性淋巴瘤细胞对肿瘤坏死因子凋亡诱导配体(TRAIL)凋亡抵抗中的调节作用,为临床克服肿瘤耐药提供治疗靶点。方法分别采用500μg/L TRAIL 和/或10 nmol/L 蛋白酶体抑制剂 PS-341处理恶性淋巴瘤细胞(CRL)和正常... 详细信息

目的探讨凋亡蛋白 Bax 在恶性淋巴瘤细胞对肿瘤坏死因子凋亡诱导配体(TRAIL)凋亡抵抗中的调节作用,为临床克服肿瘤耐药提供治疗靶点。方法分别采用500μg/L TRAIL 和/或10 nmol/L 蛋白酶体抑制剂 PS-341处理恶性淋巴瘤细胞(CRL)和正常对照细胞(HRC)。流式细胞仪检测细胞凋亡情况。荧光显色技术检测细胞半胱氨酸蛋白水解酶-8酶活性。Western 印迹检测细胞中 Bax 蛋白表达水平。免疫沉淀技术(IP)检测 Bax 蛋白的活性及构象变化。结果与 HRC 细胞比较,CRL 细胞对 TRAIL 存在显著抵抗,24 h 凋亡指数仅为21%,前者为32%,两者比较差异有统计学意义(P作用过程中 CRL 细胞中 Bax 表达呈下降趋势,24 h 表达量仅为正常量的5/17。当联合使用 PS-341后,可有效抑制 Bax 蛋白降解,6 h 表达量为正常量的1.2倍,显著增加活性;同时增加半胱氨酸蛋白酶-8酶活性,6 h 为26.5 μmol·L^(-1)·h^(-1)·mg^(-1)蛋白,从而增加细胞凋亡,6 h 凋亡指数达54%,与对照组比较差异均有统计学意义(均 P<0.01)。结论促凋亡蛋白 Bax 的下调表达参与恶性淋巴瘤细胞对 TRAIL 耐药性。合理的使用蛋白酶体抑制剂可通过抑制蛋白降解,增加其活性来有效克服肿瘤耐药。

关键词：淋巴瘤脱噬作用 Bax TRAIL