CpG寡聚脱氧核苷酸增强树突状细胞疫苗诱导的特异性抗前列腺癌作用
CpG-ODN promotes specific anti-prostate cancer induced by dendritic cells vaccine作者机构:武汉大学人民医院泌尿外科430060
出 版 物:《中华实验外科杂志》 (Chinese Journal of Experimental Surgery)
年 卷 期:2011年第28卷第6期
页 面:873-876页
核心收录:
学科分类:1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学]
基 金:基金项目:国家自然科学基金资助项目(30672107)
主 题:前列腺癌 树突状细胞 CpG寡聚脱氧核苷酸
摘 要:目的观察CpG寡聚脱氧核苷酸(CpG-ODN)对截短的人前列腺特异性膜抗原(tPSMA)基因修饰的树突状细胞(DCs)诱导的抗前列腺癌效应。方法利用复制缺陷性腺病毒AdEasy-1系统,通过基因重组技术构建Ad—tPSMA及Ad—eGFP。将Ad-tPSMA和***感染鼠源性DCs,用含10μg/L粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素(IL)-4和含10%胎牛血清(FCS)的RPMI1640培养基诱导培养6d后,然后再添加1mg/L的CpG—ODN体外培养1d,最后添加1mg/L的脂多糖(LPS)继续培养1d,使其成熟。流式细胞仪检测DCs细胞表型,CCK-8法检测混合淋巴细胞反应T细胞增殖能力,酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测T细胞分泌细胞因子[IL-2、干扰素(INF)-γ]的影响,CCK-8试剂检测T细胞特性杀伤靶细胞活性。结果***促进Ad—tPSMA感染的DCs(CpG/DCs-Ad—tPSMA)高表达MHCII(83.8±3.7)%、CD80(79.8±5.6)%和CD86(78.3±2.8)%,且刺激同种异体T细胞增殖能力明显高于DCs—Ad—tPSMA组、DCs—Ad—eGFP组和未转染的DCs组(P〈0.05);培养上清中细胞因子IL-2(179.64±2.72)ng/L和INF.1(1581.75±28.61)ng/L,表达水平均明显高于DCs—Ad—tPSMA组、***组和未转染的DCs组(P〈0.05);CpG/DCs—Ad—tPSMA组诱导RM-1-tPSMA细胞特异性杀伤率为(55.3±1.2)%,明显高于DCs—Ad—tPSMA组(40.7±1.4)%、DCs—Ad—eGFP组(12.7±1.2)%和未转染的DCs组(10.8±1.7)%(P〈0.05)。结论CpG—ODN能增强PSMA基因修饰的DCs疫苗诱导的特异性抗前列腺癌效应。