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cpg寡聚脱氧核苷酸在肿瘤免疫治疗中的应用进展

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肿瘤 2010年第4期30卷 347-351页

作者：马斌斌周佩军徐达上海交通大学医学院附属瑞金医院泌尿外科肾脏移植中心上海200025

cpg寡聚脱氧核苷酸(oligodeoxynucleotide,ODN)具有激活机体免疫系统的作用。cpg ODN能够直接诱导浆细胞样树突状细胞(plasmacytoid dendritic cell,pDC)的活化和成熟,促进Th1型细胞因子的分泌和B细胞分化成浆细胞。cpg ODN作为肿瘤疫... 详细信息

cpg寡聚脱氧核苷酸(oligodeoxynucleotide,ODN)具有激活机体免疫系统的作用。cpg ODN能够直接诱导浆细胞样树突状细胞(plasmacytoid dendritic cell,pDC)的活化和成熟,促进Th1型细胞因子的分泌和B细胞分化成浆细胞。cpg ODN作为肿瘤疫苗的佐剂已应用于多个临床试验中。单独应用cpg ODN具有抗肿瘤作用,联合其他抗肿瘤治疗(如单克隆抗体、化学治疗、放射治疗和细胞因子等)具有协同抗肿瘤作用。虽然在应用cpg ODN治疗ⅢB～Ⅳ期非小细胞肺癌(non-small celllung cancer,NSCLC)的Ⅲ期临床试验中,与标准化疗方案相比没有延长患者的中位生存期并发生较严重的不良反应,但是在其他临床试验中cpg ODN具有明确的抗肿瘤作用。cpg ODN在抗肿瘤治疗中的有效性和安全性方面还需要进一步的临床试验证实。

关键词：肿瘤免疫疗法药物疗法,联合 Toll样受体 cpg寡聚脱氧核苷酸

cpg寡聚脱氧核苷酸对变应性联合气道疾病气道重塑的影响研究

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中国全科医学 2019年第26期22卷 3191-3197页

作者：李洪涛林煜森邹小玲李文娟孟平张天托中山大学附属第三医院呼吸与危重症医学科

背景激素是变应性联合气道疾病(ACAD)常用的治疗方法,但慢性ACAD出现气道重塑,可能影响其疗效,故有必要寻找与激素联合并有协同作用的新型免疫治疗。前期研究发现cpg寡聚脱氧核苷酸(cpg-ODN)抑制ACAD气道炎症,但对气道重塑的效果有待研... 详细信息

背景激素是变应性联合气道疾病(ACAD)常用的治疗方法,但慢性ACAD出现气道重塑,可能影响其疗效,故有必要寻找与激素联合并有协同作用的新型免疫治疗。前期研究发现cpg寡聚脱氧核苷酸(cpg-ODN)抑制ACAD气道炎症,但对气道重塑的效果有待研究。目的探讨cpg-ODN对慢性ACAD小鼠模型气道重塑的影响。方法本研究时间为2016年4月-2018年3月。30只清洁级雌性BALB/c小鼠采用随机数字表法分为正常对照组(Control组)、ACAD组、变应性联合气道疾病cpg-ODN干预组(ACAD/cpg-ODN组)、变应性联合气道疾病布地奈德干预组(ACAD/BUD组)、变应性联合气道疾病cpg-ODN+BUD联合干预组(ACAD/cpg-ODN+BUD组)。实验动物腹腔卵清蛋白(OVA)或磷酸盐缓冲液(PBS)致敏,鼻腔OVA/PBS 3周激发,随之6周雾化气道激发。ACAD/cpg-ODN组、ACAD/BUD组和ACAD/cpg-ODN+BUD组分别给予cpg-ODN、BUD和cpg-ODN+BUD滴鼻,其他组给予PBS滴鼻。每次鼻腔或气道激发后10 min内,对小鼠抓鼻和喷嚏次数进行计数。HE和PAS染色观察小鼠鼻腔组织的病理特点。HE、AB-PAS和Masson’s染色观察小鼠肺组织病理变化,并行气道炎症评分。免疫组化检测肺组织转化生长因子β1(TGF-β1)和α平滑肌肌动蛋白(α-SMA),应用Image-Pro Plus图片分析软件定量评估,并进行症状评估。结果各组小鼠抓鼻次数和喷嚏次数比较,差异均有统计学意义(Pcpg-ODN组、ACAD/BUD组、ACAD/cpg-ODN+BUD组抓鼻次数和喷嚏次数均少于ACAD组(Pcpg-ODN组和ACAD/BUD组鼻黏膜病理改变较ACAD组减轻,而ACAD/cpg-ODN+BUD组进一步减轻。HE、AB-PAS和Masson’s染色显示,ACAD/cpg-ODN组和ACAD/BUD组肺组织病理改变较ACAD组减轻,而ACAD/cpg-ODN+BUD组进一步减轻。各组气道炎症评分比较,差异有统计学意义(Pcpg-ODN组、ACAD/BUD组、ACAD/cpg-ODN+BUD组气道炎症评分均低于ACAD组(Pcpg-ODN组、ACAD/BUD组、ACAD/cpgODN+BUD组均低于ACAD组(Pcpg-ODN、布地奈德抑制慢性ACAD模型鼻部炎症和支气管肺组织气道重塑,两者可能具有协同作用。

关键词：变应性联合气道疾病气道重塑 cpg寡聚脱氧核苷酸布地奈德小鼠鼻腔支气管

cpg寡聚脱氧核苷酸增强树突状细胞疫苗诱导的特异性抗前列腺癌作用

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中华实验外科杂志 2011年第6期28卷 873-876页

作者：胡建新匡幼林翁小东陈志远祝恒成江波涛刘修恒武汉大学人民医院泌尿外科 430060

目的观察cpg寡聚脱氧核苷酸（cpg-ODN）对截短的人前列腺特异性膜抗原（tPSMA）基因修饰的树突状细胞（DCs）诱导的抗前列腺癌效应。方法利用复制缺陷性腺病毒AdEasy-1系统，通过基因重组技术构建Ad—tPSMA及Ad—eGFP。将Ad-tPSMA和***... 详细信息

目的观察cpg寡聚脱氧核苷酸（cpg-ODN）对截短的人前列腺特异性膜抗原（tPSMA）基因修饰的树突状细胞（DCs）诱导的抗前列腺癌效应。方法利用复制缺陷性腺病毒AdEasy-1系统，通过基因重组技术构建Ad—tPSMA及Ad—eGFP。将Ad-tPSMA和***感染鼠源性DCs，用含10μg／L粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）、白细胞介素（IL）-4和含10％胎牛血清（FCS）的RPMI1640培养基诱导培养6d后，然后再添加1mg／L的cpg—ODN体外培养1d，最后添加1mg／L的脂多糖（LPS）继续培养1d，使其成熟。流式细胞仪检测DCs细胞表型，CCK-8法检测混合淋巴细胞反应T细胞增殖能力，酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒检测T细胞分泌细胞因子[IL-2、干扰素（INF）-γ]的影响，CCK-8试剂检测T细胞特性杀伤靶细胞活性。结果***促进Ad—tPSMA感染的DCs（cpg／DCs-Ad—tPSMA）高表达MHCII（83．8±3．7）％、CD80（79．8±5．6）％和CD86（78．3±2．8）％，且刺激同种异体T细胞增殖能力明显高于DCs—Ad—tPSMA组、DCs—Ad—eGFP组和未转染的DCs组（P〈0．05）；培养上清中细胞因子IL-2（179．64±2．72）ng／L和INF．1（1581．75±28．61）ng／L，表达水平均明显高于DCs—Ad—tPSMA组、***组和未转染的DCs组（P〈0．05）；cpg／DCs—Ad—tPSMA组诱导RM-1-tPSMA细胞特异性杀伤率为（55．3±1．2）％，明显高于DCs—Ad—tPSMA组（40．7±1．4）％、DCs—Ad—eGFP组（12．7±1．2）％和未转染的DCs组（10．8±1．7）％（P〈0．05）。结论cpg—ODN能增强PSMA基因修饰的DCs疫苗诱导的特异性抗前列腺癌效应。

关键词：前列腺癌树突状细胞 cpg寡聚脱氧核苷酸

cpg寡聚脱氧核苷酸佐剂对狂犬病疫苗免疫效果的影响

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中国生物制品学杂志 2017年第6期30卷 566-570页

作者：闫江泓于鹏程陶晓燕刘淑清吴未辰卢学新李淑英朱武洋华北理工大学基础医学院河北省慢性疾病重点实验室唐山市慢性病临床基础研究重点实验室河北唐山063000 中国疾病预防控制中心病毒病所北京100052

目的探讨cpg寡聚脱氧核苷酸(cpg oligodeoxynucleotides,cpg ODN)对狂犬病疫苗(rabies vaccine,RV)免疫效果的影响。方法以市售狂犬病疫苗为抗原,分别以低、中、高剂量的cpg ODN(1.25、5、20μg/剂)及其与氢氧化铝[(Al(OH)_3]联合的复... 详细信息

目的探讨cpg寡聚脱氧核苷酸(cpg oligodeoxynucleotides,cpg ODN)对狂犬病疫苗(rabies vaccine,RV)免疫效果的影响。方法以市售狂犬病疫苗为抗原,分别以低、中、高剂量的cpg ODN(1.25、5、20μg/剂)及其与氢氧化铝[(Al(OH)_3]联合的复合物作为疫苗佐剂,按Essen程序经腿部肌肉免疫BALB/c小鼠。免疫前2 d及首次免疫后分别于第6、8、10、14、35和42天采血,分离血清,通过快速荧光灶抑制试验(rapid fluorescent focus inhibition test,RFFIT)检测血清中抗狂犬病病毒中和抗体效价;并经ELISPOT法分析首次免疫第6和14天小鼠脾细胞分泌IFNγ的情况。结果低、中剂量的cpg ODN及其与Al(OH)_3联合使用均可使小鼠在首次免疫后第8天产生具有保护水平的中和抗体,第10天阳转率均达100%;在首次免疫后第35及42天,小鼠产生抗狂犬病病毒中和抗体水平均明显升高(Pcpg ODN可明显提高小鼠脾细胞的IFNγ分泌水平(Pcpg ODN对RV具有免疫增效作用,可能成为一种新型的RV佐剂。

关键词： cpg寡聚脱氧核苷酸佐剂狂犬病疫苗体液免疫细胞免疫

cpg寡聚脱氧核苷酸抑制人膀胱癌细胞在裸鼠体内的生长

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实用医学杂志 2010年第6期26卷 930-933页

作者：何威周佩军沈周俊马斌斌上海交通大学医学院附属瑞金医院泌尿外科 200025

目的:观察不同剂量的cpg ODN 1668对裸鼠皮下接种人膀胱移行细胞癌T24细胞生长的抑制作用,并与卡介苗的作用进行比较。方法:通过皮下接种T24细胞,建立裸鼠皮下接种人膀胱癌细胞的动物模型。将裸鼠随机分为5组,(1)对照组;(2)BCG组;(3)小... 详细信息

目的:观察不同剂量的cpg ODN 1668对裸鼠皮下接种人膀胱移行细胞癌T24细胞生长的抑制作用,并与卡介苗的作用进行比较。方法:通过皮下接种T24细胞,建立裸鼠皮下接种人膀胱癌细胞的动物模型。将裸鼠随机分为5组,(1)对照组;(2)BCG组;(3)小剂量cpg ODN 1668组;(4)中等剂量cpg ODN 1668组;(5)大剂量cpg ODN 1668组。自肿瘤细胞接种后第1天起给药,共4次(第1、8、15、22天),在肿瘤周围多点注射相应药物(早期给药);同样方式另设5组动物,自肿瘤细胞接种后第7天起(第7、14、21、28天)于肿瘤周围多点注射相应药物(延迟给药)。观察肿瘤体积和裸鼠的生存率。结果:早期给药时,在cpg ODN 1668各剂量组和BCG组,肿瘤生长均被抑制,裸鼠的生存期得到延长。中等剂量和大剂量cpg ODN 1668组对肿瘤细胞生长的抑制作用强于BCG组。延迟给药时,cpg ODN 1668各剂量组肿瘤体积和裸鼠的生存率,与对照组和BCG组的差异无显著统计学意义。结论:cpg ODN 1668的早期应用,可抑制人膀胱癌细胞T24在裸鼠体内的生长,并表现为剂量依赖性;其抗肿瘤效应是非T细胞依赖的。当加大使用剂量时,cpg ODN 1668对膀胱癌细胞生长的抑制作用强于BCG。而当肿瘤负荷较大时,cpg ODN 1668和BCG的延迟使用对膀胱肿瘤细胞在裸鼠体内的生长无抑制作用。

关键词：卡介苗 cpg寡聚脱氧核苷酸人膀胱癌细胞裸鼠

新cpg寡聚脱氧核苷酸体内抗肿瘤与增强免疫活性研究

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军事医学科学院院刊 2007年第4期31卷 355-358,361页

作者：杜海燕宋海峰夏绍友李娜欧伦邹佳孙效吉爱国汤仲明山东大学药学院生化与生物技术药物研究所济南250012 军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京100850 解放军总医院普通外科北京100853

目的:探讨新设计cpg寡聚脱氧核苷酸(ODN)在小鼠体内的抗肿瘤作用及其对荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法:建立C57BL/6小鼠腹腔、皮下荷黑素瘤肿瘤模型,腹腔注射cpgODN,观察荷瘤鼠生存时间、肿瘤生长曲线,计算抑瘤率。用酶联免疫吸附试验(EL... 详细信息

目的:探讨新设计cpg寡聚脱氧核苷酸(ODN)在小鼠体内的抗肿瘤作用及其对荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法:建立C57BL/6小鼠腹腔、皮下荷黑素瘤肿瘤模型,腹腔注射cpgODN,观察荷瘤鼠生存时间、肿瘤生长曲线,计算抑瘤率。用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠血清中白细胞介素(IL)12和免疫球蛋白E(IgE)含量;3H-TDR掺入法检测脾脏B细胞、T细胞增殖活性;51Cr释放法检测NK细胞杀伤活性;中性红法检测腹腔巨噬细胞吞噬功能。结果:cpg10,cpg11能明显延长腹腔接种肿瘤小鼠的生存时间,与阳性对照cpg1826相比Pcpg1826[抑瘤率(17.8±7.6)%](Pcpg10/cpg11可促使荷瘤小鼠血清IL-12含量显著升高(Pcpgl0免疫增强活性较cpgl826更强(PcpgODN能激活荷瘤鼠抗肿瘤免疫反应,从而抑制小鼠黑素瘤的生长,新结构寡核苷酸的cpg10呈现优于阳性对照的良好抗肿瘤免疫效应。

关键词： cpg寡聚脱氧核苷酸黑素瘤免疫活性白细胞介素12 免疫球蛋白E

cpg寡聚脱氧核苷酸应用于变态反应性鼻炎的研究进展

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昆明医科大学学报 2009年第S2期32卷 182-185页

作者：徐章智宣威市第一人民医院云南宣威655400

近年来,变态反应性鼻炎发病率呈明显上升趋势.一些研究发现cpgDNA在变态反应性鼻炎治疗中具有其它传统治疗药物无可比拟的优势,虽然目前还处于动物模型及前期临床实验阶段,并且机制还不完全清楚,但越来越受到人们的重视.着重介绍了对目... 详细信息

近年来,变态反应性鼻炎发病率呈明显上升趋势.一些研究发现cpgDNA在变态反应性鼻炎治疗中具有其它传统治疗药物无可比拟的优势,虽然目前还处于动物模型及前期临床实验阶段,并且机制还不完全清楚,但越来越受到人们的重视.着重介绍了对目前人们对cpgDNA的认识进行了,并对其用于变态反应性鼻炎治疗的现状进行了综述.

关键词： cpg寡聚脱氧核苷酸变态反应性鼻炎特异性免疫治疗

cpg寡聚脱氧核苷酸在灵长类动物中免疫调节活性的研究进展

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东南大学学报（医学版） 2004年第4期23卷 273-277,281页

作者：茅丹刘景晶中国药科大学生命科学与技术学院江苏南京210009

包含cpg基序的寡聚脱氧核苷酸 (ODN)具有类似于微生物DNA激活内在免疫系统的能力 ,可提高适应性免疫力而抑制传染性生物的早期传播。cpgODN在疫苗佐剂的设计以及哮喘、过敏、传染病和癌症的治疗中显示出良好的应用前景。由于cpg识别体... 详细信息

包含cpg基序的寡聚脱氧核苷酸 (ODN)具有类似于微生物DNA激活内在免疫系统的能力 ,可提高适应性免疫力而抑制传染性生物的早期传播。cpgODN在疫苗佐剂的设计以及哮喘、过敏、传染病和癌症的治疗中显示出良好的应用前景。由于cpg识别体系在进化中出现的种间差异 ,在啮齿类动物中表现出最强活性的cpgODN却无法有效地刺激灵长类动物产生免疫应答。已有大量证据表明cpgODN在小鼠中具有治疗活性 ,而其在灵长类动物中作用的研究仍需继续深入。现就作用于灵长类动物的cpgODN的分类、作用机制和其作为疫苗佐剂与免疫保护剂以及在癌症。

关键词： cpg寡聚脱氧核苷酸灵长类动物免疫调节活性免疫反应细胞靶点

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新型的免疫佐剂:cpg寡聚脱氧核苷酸

中国临床医学 2008年第5期15卷 673-676页

作者：何威周佩军沈周俊上海交通大学医学院附属瑞金医院泌尿外科上海200025

1 背景人体拥有两大在功能上互补的免疫系统:天然免疫系统和获得性免疫系统.获得性免疫系统在进化上高度成熟,其功能由B细胞和T细胞介导,具有免疫记忆和两次免疫的特征.相对于获得性免疫系统而言,天然免疫系统在进化上更为古老,为了保... 详细信息

1 背景人体拥有两大在功能上互补的免疫系统:天然免疫系统和获得性免疫系统.获得性免疫系统在进化上高度成熟,其功能由B细胞和T细胞介导,具有免疫记忆和两次免疫的特征.相对于获得性免疫系统而言,天然免疫系统在进化上更为古老,为了保护机体免受感染,天然免疫必须完成4项基本任务:(1)快速识别感染源,无论感染源是细菌、病毒、真菌或寄生虫;(2)快速区分感染是属于细胞内或细胞外;(3)激活针对病原体的免疫防御体系,清除或至少暂时控制感染;(4)诱导相应的获得性免疫以清除感染并防止两次感染.当机体接触到各种病原微生物所表达的病原体相关分子模式(pathogen associated molecular pattern,PAMP)时,天然免疫系统被激活,而使机体识别PAMP并将其分类的是模式识别受体(pattern recognition receptor,PRR).目前研究得最清楚的PRR是Toll样受体(Toll-like receptor,TLR),TLR作为一个家族存在,其成员不下10个,可以同二聚体或异二聚体的形式识别各种病原体.

关键词： cpg寡聚脱氧核苷酸免疫佐剂天然免疫系统 T细胞介导感染源获得性免疫记忆快速识别