DNA甲基化在小鼠脓毒症相关性脑病中的作用

作     者：于明懂 李佩 于泳浩 卢悦淳 陈会敏 王新 谢克亮 王国林 Yu Mingdong;Li Pei;Yu Yonghao;Lu Yuechun;Chen Huimin;Wang Xin;Xie Keliang;Wang Guolin

作者机构：天津医科大学第二医院麻醉科300211 天津市天津医院麻醉科300211 天津医科大学总医院麻醉科天津市麻醉学研究所300052 

出 版 物：《中华麻醉学杂志》 (Chinese Journal of Anesthesiology)

年 卷 期：2019年第39卷第8期

页      面：996-1000页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(81671888,81772043) 天津市自然科学基金(18JCZDJC35100,17JCYBJC24800) 天津市科技计划项目(18YFZCSY00560) 

主　　题：DNA甲基化 脓毒症相关性脑病 

摘      要：目的评价DNA甲基化在小鼠脓毒症相关性脑病中的作用。方法清洁级健康雄性C57BL/6小鼠144只,6~8周龄,体重20~25 g,采用随机数字表法分为4组(n=36):假手术组(Sham组)、脓毒症组(Sepsis组)、假手术+SAM组(Sham+SAM组)和脓毒症+SAM组(Sepsis+SAM组)。采用盲肠结扎穿孔(CLP)法制备小鼠脓毒症相关性脑病模型。Sham+SAM组和Sepsis+SAM组于术前1 h及术后12 h腹腔注射DNA甲基化的甲基供体S-腺苷甲硫氨酸(SAM)100 mg/kg,Sham组和Sepsis组腹腔注射等量生理盐水。于CLP后1、3和7 d时通过Y-迷宫和条件恐惧实验检测小鼠认知功能;于CLP后1、3和7 d时处死小鼠取海马组织,采用比色法测定全基因组DNA甲基化水平,采用实时荧光定量PCR法检测DNA甲基化转移酶(DNMTl、DNMT3a和DNMT3b)、TET(TET1、TET2和TET3)和TDG的mRNA表达水平。结果与Sham组比较,Sepsis组新异臂停留时间缩短,僵直时间百分比和各臂穿梭次数总和减少,CLP后1、3和7 d时小鼠海马组织全基因组甲基化水平降低,DNMT1、DNMT3a、TET1、TET2、TET3和TDG mRNA表达上调,DNMT3b mRNA表达下调(P0.05);与Sepsis组比较,Sepsis+SAM组新异臂停留时间延长,僵直时间百分比和各臂穿梭次数总和明显增加,各时点DNMT1、DNMT3a、TET1、TET2、TET3和TDG的mRNA表达下调,DNMT3b mRNA表达上调(P0.05)。结论海马DNA甲基化参与了小鼠脓毒症相关性脑病发生的过程。