miR-4295在鼻咽癌细胞增殖中的作用

作     者：钟文 肖烈钢 易瑶 钟海林 谢栋 ZHONG Wen;XIAO Lie gang;YI Yao;ZHONG Hai lin;XIE Dong

作者机构：中国人民解放军陆军第74集团军医院体检中心广东广州510318 中国人民解放军陆军第74集团军医院中西医结合科广东广州510318 中国人民解放军陆军第74集团军医院门诊部广东广州510318 南部战区海军第一医院五官科广东湛江524005 

出 版 物：《热带医学杂志》 (Journal of Tropical Medicine)

年 卷 期：2019年第19卷第11期

页      面：1343-1347页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：广州市科技计划项目(201707010025) 

主　　题：miR-4295 鼻咽癌 细胞增殖 3′UTR SOX9 

摘      要：目的探讨miR-4295在鼻咽癌细胞发生发展及增殖过程中的作用及相关的分子机制。方法通过脂质体转染miR-4295 mimic,inhibitor及其NC到鼻咽癌细胞株6-10B,CNE2。分别应用MTT实验、软琼脂集落形成实验检测miR-4295对鼻咽癌细胞增殖能力的影响;WB和QPCR方法检测miR-4295、细胞周期素D1(CyclinD1)、p21cip1、Rb、pRb在细胞中蛋白及mRNA的表达水平。通过Targetscan分析预测miR-4295与SOX9的3’UTR的结合情况,采用双荧光素酶报告实验检测miR-4295与SOX9的结合情况,同时采用WB检测细胞株中SOX9的表达。结果MTT、软琼脂集落形成实验均显示过表达miR-4295后鼻咽癌细胞增殖能力明显增强,细胞生长速率高于NC组,细胞集落形成个数多于NC组,差异均有统计学意义(P0.05);而miR-4295沉默后鼻咽癌细胞增殖能力明显降低,与NC-in组相比,差异有统计学意义(P0.05);WB及QPCR结果显示:过表达miR-4295后,细胞周期蛋白CyclinD1表达升高而细胞周期抑制因子p21cip1下调;通过Targetscan预测发现miR-4295靶向结合SOX9的3’UTR,荧光素酶活性检测结果发现miR-4295过表达后荧光素酶活性明显低于NC组及突变组,差异有统计学意义(P0.05)。结论上调miR-4295可通过抑制SOX9蛋白翻译从而促进鼻咽癌细胞增殖能力,并调节细胞周期相关蛋白,在鼻咽癌发生发展中扮演重要的角色。