北极狐γ-干扰素cDNA的克隆、表达及活性测定

作     者：张海玲 柴秀丽 罗国良 王凤雪 易立 邵西群 闫喜军 Hailing Zhang;Xiuli Chai;Guoliang Luo;Fengxue Wang;Li Yi;Xiqun Shao;Xijun Yan

作者机构：中国农业科学院特产研究所吉林132109 

出 版 物：《生物工程学报》 (Chinese Journal of Biotechnology)

年 卷 期：2008年第24卷第9期

页      面：1625-1630页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 0831[工学-生物医学工程（可授工学、理学、医学学位）] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：吉林省科技发展计划项目(No.20060550)资助~~ 

主　　题：北极狐 干扰素-γ 抗病毒活性 

摘      要：为研究狐γ-干扰素的生物学活性,应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)从北极狐外周血淋巴细胞中扩增出γ-干扰素(VuIFN-γ)cDNA。序列分析表明VuIFN-γcDNA全长501bp,编码23个氨基酸的信号肽和144个氨基酸的成熟肽蛋白,与已发表的银黑狐和犬IFN-γ核苷酸序列同源性为99.8%和99.4%;氨基酸同源性均为100%。应用原核表达系统高效表达北极狐γ-干扰素成熟肽蛋白,SDS-PAGE和Western blotting分析表达的融合蛋白分子量约为19kD,以不溶性的包涵体形式存在。重组蛋白经纯化和复性,在Vero和MDCK细胞上可明显抑制VSV病毒的复制,并测出北极狐重组γ-干扰素的活性单位分别为1.0×106u/mg和1.56×105u/mg,为进一步开发基因工程狐干扰素奠定基础。