Linc00176靶向miR-338-3/SMO轴对肝癌细胞增殖和迁移的影响

作     者：李凌 陈思翰 朱德东 石小军 韦勇宁 王哲 袁登高 LI Ling;CHEN Si-han;ZHU De-dong;SHI Xiao-jun;WEI Yong-ning;WANG Zhe;YUAN Deng-gao

作者机构：中国科学院大学宁波华美医院北郊院区 

出 版 物：《肿瘤学杂志》 (Journal of Chinese Oncology)

年 卷 期：2019年第25卷第10期

页      面：858-863页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主　　题：Linc00176 肝肿瘤 miR-338-3p SMO 增殖 迁移 

摘      要：[目的]探讨基因间长链非编码RNA Linc00176靶向miR-338-3p/SMO对肝癌(HCC)细胞增殖和迁移的影响。[方法]收集手术切除的肝癌患者的HCC组织和癌旁组织标本各96例,采用荧光定量PCR检测Linc00176和miR-338-3p在HCC组织和癌旁组织中的表达水平;构建shRNA-Control、 shRNA-Linc00176、miRNA-Control和miR-338-3p慢病毒肝癌细胞系,采用生物信息学和双荧光素酶报告基因检测分析Linc00176和miR-338-3p的靶向关系;采用CCK-8法和异种移植瘤实验检测各组细胞的增殖能力;采用Transwell分析各组细胞的迁移能力;采用Western blot检测各组细胞中SMO蛋白的表达水平。[结果] Linc00176在HCC组织中的mRNA相对表达水平(1.94±0.21)显著高于癌旁组织(0.57±0.10);miR-338-3p在HCC组织中的mRNA相对表达水平(0.35±0.08)显著低于癌旁组织(1.62±0.15),差异均有统计学意义(P0.05)。生物信息学分析显示Linc00176可能通过靶向调控miR-338-3p的表达,进一步影响SMO蛋白的表达。双荧光素酶报告基因检测显示转染Linc00176-WT的miR-338-3p细胞(0.33±0.08)的相对荧光素酶活性显著低于miRNA-Control组细胞(1.25±0.16),差异有统计学意义(P0.05)。CCK-8和异种移植瘤实验显示shRNA-Linc00176和miR-338-3p组细胞的增殖活力和成瘤能力与其各自的对照组相比显著下降,差异均有统计学意义(P0.05)。Transwell结果表明与shRNA-Control组(134.47±12.29)和miRNA-Control组(129.87±13.06)比较,shRNA-Linc00176组(53.17±8.74)和miR-338-3p组(44.61±8.02)细胞的迁移个数均显著下降,差异有统计学意义(P0.05)。Western blot结果显示,shRNA-Linc00176和miR-338-3p组细胞中SMO的蛋白表达水平较shRNA-Control和miRNA-Control组均显著降低,差异有统计学意义(P0.05)。[结论]Linc00176可能通过靶向调控miR-338-3p/SMO的表达促进HCC细胞的增殖和迁移。