miR-185-5p mimic阻碍黑色素瘤A375细胞的侵袭、迁移和上皮间质转化及肿瘤形成
miR-185-5p Mimic Blocks the Invasion, Migration, Epithelial-mes-enchymal Transition and Tumor Formation of Melanoma A375 Cells作者机构：武汉市第一医院皮肤科武汉市430022 武汉市第一医院中医科武汉市430022 武汉市第一医院放射科武汉市430022
出 版 物：《医学分子生物学杂志》 (Journal of Medical Molecular Biology)
年 卷 期：2019年第16卷第5期
页 面：422-428页
学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学]
基 金：湖北省卫生健康委科研项目(No. WJ2019M025)
主 题：miR-185-5p mimic MAPK14 黑色素瘤 上皮间质转化
摘 要：目的研究miR-185-5p mimic靶向MAPK14阻碍黑色素瘤A375细胞的侵袭,迁移和上皮间质转化,抑制肿瘤生长的影响.方法采用LipofecamineTM2000分别或同时对A375细胞转染miR-185 mimic和pcDNA-MAPK14,通过RT-PCR与荧光素酶实验验证miR-185-5p与MAPK14的靶向关系;transwell小室和细胞划痕实验分析miR-185-5p过表达对A375细胞侵袭、迁移能力的影响;Western印迹分析miR-185-5p过表达对A375细胞VEGF、 E-cadherin、 N-cadherin水平的影响.构建移植瘤裸鼠模型,检测30 d时肿瘤重量, RT-PCR分析肿瘤组织中miR-185-5p和MAPK14 的表达量;免疫组化分析肿瘤组织中Ki67 及VEGF水平.结果 miR-185 mimic能够促进miR-185-5p表达,抑制MAPK14表达( P0. 05),荧光素酶报告实验表明miR-185-5p和MAPK14之间存在靶向调控关系. miR-185-5pmimic能够抑制A375细胞的侵袭、迁移能力( P0. 05),抑制细胞 VEGF、 N-cadherin 水平,增加 E-cadherin 水平( P 0. 05).移植瘤裸鼠模型显示, miR-185 mimic能够明显抑制移植瘤的生长,上调肿瘤组织中miR-185-5p表达,下调MAPK14表达,降低Ki67、 VEGF水平(P0. 05).结论 miR-185-5p mimic 靶向 MAPK14 通过阻断细胞的 EMT 机制,降低Ki67、 VEGF水平,抑制黑色素瘤A375细胞的侵袭、迁移和肿瘤形成.
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