双向电泳分析肝癌细胞线粒体的差异表达蛋白

作     者：李兴 潘卫 邱峰 田昆仑 邱宗荫 LI Xing;PAN Wei;QIU Feng;TIAN Kun-Lun;QIU Zong-Yin

作者机构：重庆医科大学医学检验系 贵阳医学院医学检验系贵州贵阳550004 贵阳医学院医学检验系 第三军医大学野战外科研究所第二研究室重庆400016 

出 版 物：《癌症》 (Chinese Journal of Cancer)

年 卷 期：2005年第24卷第11期

页      面：1327-1331页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(No.30476021)~~ 

主　　题：肝肿瘤 QGY-7703细胞株 L02细胞株 双向电泳 线粒体 差异表达 

摘      要：背景与目的:线粒体在细胞凋亡中扮演关键的角色,对线粒体蛋白质组的研究可能有助于解释癌症的发生、早期诊断以及抗癌药物的研发。本研究对正常肝细胞L02线粒体、表阿霉素干预前后肝癌细胞QGY-7703线粒体进行二维电泳图谱的比较分析,筛选差异表达蛋白斑点。方法:运用蔗糖密度梯度的超离心方法分离纯化线粒体,双向凝胶电泳分离线粒体蛋白质,ImageMaster2D软件对所得图谱进行图像分析。结果:L02细胞线粒体、表阿霉素干预前QGY-7703细胞线粒体、表阿霉素干预后QGY-7703细胞线粒体三种标本超离心后,其纯化线粒体琥珀酸脱氢酶比活力分别提高13.8、11.8、10.2倍。L02细胞线粒体和表阿霉素干预前后QGY-7703细胞线粒体经双向凝胶电泳分辨出206、217、214个蛋白斑点,L02细胞与QGY-7703细胞比较筛选出49个差异表达蛋白斑点;表阿霉素干预前后的QGY-7703细胞进行比较,筛选到29个差异表达蛋白斑点。结论:运用超离心和双向电泳的方法成功筛选出一批在QGY-7703细胞线粒体中差异表达的蛋白斑点。