人脐带间充质干细胞与肝细胞共培养可分化为肝样细胞

作     者：李华 文峰 漆仲春 周进军 朱亚杰 程朋 魏东 苏晓妹 谭勇 彭晶晶 罗巧丽 李东 张涛 Li Hua;Wen Feng;Qi Zhong-chun;Zhou Jin-jun;Zhu Ya-jie;Cheng Peng;Wei Dong;Su Xiao-mei;Tan Yong;Peng Jing-jing;Luo Qiao-li;Li Dong;Zhang Tao

作者机构：解放军成都军区总医院肿瘤诊治中心四川省成都市610083 成都医学院第一附属医院肿瘤科四川省成都市610513 

出 版 物：《中国组织工程研究》 (Chinese Journal of Tissue Engineering Research)

年 卷 期：2013年第17卷第32期

页      面：5772-5777页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 071007[理学-遗传学] 

基　　金：四川省科技厅面上项目(2009JY0016 2012JY0031) 四川省科技支撑计划(2012SZ0058) 

主　　题：干细胞 脐带脐血干细胞 脐带间充质干细胞 肝细胞 共培养 细胞分化 细胞培养 肝样细胞 甲胎蛋白 白蛋白 人细胞角蛋白19 省级基金 干细胞图片文章 

摘      要：背景:文献报道,从骨髓与脐带中分离获得的间充质干细胞可在体外连续传代培养,仍保持干细胞的特性,并在多种细胞因子的鸡尾酒式诱导下分化为肝细胞样细胞。目的:进一步验证人脐带间充质干细胞在体外正常人肝细胞共培养体系下是否可分化为肝细胞并探讨其分化方法。方法:采用贴壁法,从脐带中分离培养间充质干细胞,流式细胞仪检测脐带间充质干细胞表面标志。人肝细胞LO2细胞与人脐带间充质干细胞建立共培养体系,不添加外源诱导因子,分别于第7,14,21天,通过RT-PCR法检测肝细胞特异标志物甲胎蛋白、白蛋白、人细胞角蛋白19mRNA的表达,糖原染色进行功能鉴定。结果与结论:从人脐带中可分离得到贴壁生长的间充质干细胞,其中CD29+细胞比例为96.02%,CD105+细胞比例为96.6%,CD34-细胞比例为99.65%,CD105+CD29+双阳性细胞比例为94.84%。与LO2细胞共培养后第7天仅有甲胎蛋白阳性表达;第14天表达白蛋白、人细胞角蛋白19,第21天时,LO2与人脐带间充质干细胞共培养组未出现甲胎蛋白表达;人细胞角蛋白19和白蛋白的表达比第14天略有增强。共培养21d后,糖原染色呈阳性。结果证实,无需额外添加外源诱导因子,脐带间充质干细胞可在人正常肝细胞共培养的微环境中,向正常肝细胞分化。