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大型纤毛虫总RNA的提取方法

Total RNA Extraction from Large Ciliates

作     者:刘星吟 毛永真 陈建欢 李甘霖 金立培 

作者机构:中山大学生命科学学院广州510275 香港理工大学生化应用系 

出 版 物:《动物学杂志》 (Chinese Journal of Zoology)

年 卷 期:2004年第39卷第5期

页      面:44-47页

核心收录:

学科分类:0710[理学-生物学] 071010[理学-生物化学与分子生物学] 081704[工学-应用化学] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术] 

基  金:国家自然科学基金资助项目 (No .30 370 2 10 ) 

主  题:大型纤毛虫 冠突伪尾柱虫 RNA提取 

摘      要:以冠突伪尾柱虫为材料 ,建立了一种适合于富含RNase和多糖的大型纤毛虫总RNA的提取方法。该方法采用异硫氰酸胍和 β 巯基乙醇联合快速变性 ,酚、氯仿和异戊醇抽提 ,同时在变性剂存在的条件下两次选择性地沉淀RNA ,从而有效地去除了DNA、蛋白质和多糖。所得RNA样品经电泳、紫外分光光度法检测和RT PCR分析 ,证实为完整、均一且无基因组污染的总RNA。这为构建冠突伪尾柱虫有小核系与无小核系之间的削减文库、筛选两细胞系差异表达的基因奠定了基础。

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