miR-19a通过抑制c-MET的表达逆转HCC827细胞吉非替尼耐药

作     者：来森艳 曹小年 吴维 李国东 胡发涌 罗学来 Lai Senyan;Cao Xiaonian;Wu Wei

作者机构：华中科技大学同济医学院附属同济医院胃肠外科武汉430030 华中科技大学同济医学院附属同济医院胸外科武汉430030 

出 版 物：《华中科技大学学报（医学版）》 (Acta Medicinae Universitatis Scientiae et Technologiae Huazhong)

年 卷 期：2019年第48卷第2期

页      面：168-171页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(No.81301899 81702264) 

主　　题：HCC827细胞 miR-19a 吉非替尼 耐药 c-MET 

摘      要：目的明确miR-19a在调控HCC827细胞吉非替尼耐药中的作用及机制,探索miR-19a作为非小细胞肺癌(NSCLC)患者吉非替尼耐药新靶点的理论依据。方法收集非小细胞肺癌患者15例在吉非替尼耐药前后的外周血,通过Real-time PCR检测其中miR-19a的表达;在吉非替尼敏感的HCC827细胞中降低miR-19a表达,并加入吉非替尼,通过CCK8法检测其对细胞活力的影响;在构建成功的HCC827吉非替尼耐药细胞株(HCC827GR)中过表达miR-19a,并加入吉非替尼,通过CCK8法检测其对细胞活力的影响;在HCC827及HCC827GR细胞中分别降低或过表达miR-19a,通过Western blot检测c-MET蛋白表达水平;在HCC827细胞中同时降低miR-19a和c-MET表达,并加入不同浓度吉非替尼,通过CCK8法检测各组细胞活力。结果在吉非替尼耐药的NSCLC患者外周血中,miR-19a呈明显低表达状态;在HCC827细胞中降低miR-19a表达,吉非替尼对细胞活力的抑制效果明显下降(P0.01);在HCC827GR细胞中过表达miR-19a,吉非替尼对细胞活力的抑制效果明显增强(P0.01);在HCC827细胞中降低miR-19a表达,能明显促进c-MET蛋白的表达;相反,在HCC827GR细胞中过表达miR-19a,则明显抑制c-MET蛋白的表达;在HCC827细胞中同时降低miR-19a和c-MET表达,并加入不同浓度的吉非替尼,低表达c-MET能够抵消miR-19a对细胞活力的影响。结论 miR-19a在非小细胞肺癌细胞HCC827吉非替尼耐药中发挥着重要作用,其机制可能是通过抑制c-MET蛋白水平的表达。