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生脉散对2型糖尿病大鼠心肌氧化应激的作用及miR-19a、PPARα、CD36因子的影响

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中华中医药杂志 2022年第4期37卷 2218-2222页

作者：李莺莺王卫王欣王芙蓉山东中医药大学济南250355 山东中医药大学中医学院

目的:观察生脉散对2型糖尿病(T2DM)大鼠心肌组织氧化应激的影响并探讨其作用机制。方法:采用SD大鼠建立T2DM模型。将造模成功大鼠随机分为模型组(n=15)和生脉散组(n=15),另设正常组(n=10)。正常组与模型组均给予蒸馏水灌胃,生脉散组给... 详细信息

目的:观察生脉散对2型糖尿病(T2DM)大鼠心肌组织氧化应激的影响并探讨其作用机制。方法:采用SD大鼠建立T2DM模型。将造模成功大鼠随机分为模型组(n=15)和生脉散组(n=15),另设正常组(n=10)。正常组与模型组均给予蒸馏水灌胃,生脉散组给予生脉散灌胃。给药10周后取大鼠心肌检测氧化应激标志物丙二醛(MDA)水平、超氧化物歧化酶(SOD)与谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性;同时测定大鼠心肌组织miR-19a水平及过氧化物酶体增殖剂激活受体α(PPARα)和脂肪酸转位酶簇决定因子36(CD36)表达量。结果:与正常组比较,模型组大鼠心肌MDA含量及PPARα、CD36水平显著升高(PmiR-19a水平显著降低(PmiR-19a水平显著升高(PmiR-19a水平进而调控PPARα/CD36信号通路有关。

关键词：糖尿病心肌病生脉散氧化应激 miR-19a 过氧化物酶体增殖剂激活受体α 脂肪酸转位酶簇决定因子36

miR-19a通过调节PTEN对肝癌的抑制作用

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武汉大学学报（医学版） 2022年第4期43卷 604-607,663页

作者：蔡涛宋小兵江汉大学附属湖北省第三人民医院胃肠外科湖北武汉430030 武汉大学中南医院急救中心湖北武汉430071

目的:探讨miR-19a通过调节PTEN在肝癌中有抑制肝癌细胞的作用。方法:分析miR-19a表达与肝癌临床病理特征以及预后的关系;用RT-PCR的方法检测miR-19a基因在100例肝癌组织、相应的癌旁组织以及肝癌细胞HepG2中的表达;Western Blot检测PTE... 详细信息

目的:探讨miR-19a通过调节PTEN在肝癌中有抑制肝癌细胞的作用。方法:分析miR-19a表达与肝癌临床病理特征以及预后的关系;用RT-PCR的方法检测miR-19a基因在100例肝癌组织、相应的癌旁组织以及肝癌细胞HepG2中的表达;Western Blot检测PTEN及其下游通路蛋白的表达。采用双荧光素报告基因验证miR-19a对PTEN的靶向调控作用。结果:在肝癌患者中,低表达的miR-19a与较小的肿瘤体积(PmiR-19a抑制剂和WT-PTEN-3′UTR共转染可明显促进萤光素酶活性(PmiR-19a在肝癌中表达升高,且低表达的miR-19a可以通过上调PTEN表达进一步抑制肝癌细胞的增殖。其具有重要的应用前景和临床应用价值。

关键词： miR-19a mirNA 肝癌

间充质干细胞来源的外泌体通过miR-19a/IGFBP3轴促进损伤肌腱的修复

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间充质干细胞来源的外泌体通过miR-19a/IGFBP3轴促进损伤肌腱的修...

作者：赵海波青岛大学

学位级别：硕士

研究目的随着人们运动意识的增强,肌腱损伤的发生率逐年上升。肌腱损伤的治疗有多种策略,这些方法有时伴随着恢复不良或药物对患者身体的潜在危害。近年来,间充质干细胞(MSCs)在组织修复中的运用越来越多。然而,MSCs分泌的外泌体(Mesenc... 详细信息

研究目的随着人们运动意识的增强,肌腱损伤的发生率逐年上升。肌腱损伤的治疗有多种策略,这些方法有时伴随着恢复不良或药物对患者身体的潜在危害。近年来,间充质干细胞(MSCs)在组织修复中的运用越来越多。然而,MSCs分泌的外泌体(Mesenchymal stem cells exosomes,MSC-exos)在肌腱损伤中的作用及潜在机制在很大程度上尚不明确。在本研究中,我们主要探讨了MSC-exos对肌腱损伤修复的影响及其可能的作用机制。方法分别将MSCs和MSC-exos添加到受损的肌腱细胞其培养基中,通过采用HE染色和免疫组化实验来观察比较不同组之间的组织形态,采用免疫酶联反应(ELISA)来检测肌腱细胞氧化应激的情况,进一步采取细胞增殖实验(MTT)、流式实验(FCM)和免疫印迹反应实验(WB)来观察肌腱细胞的增殖和凋亡情况,通过这些实验来探讨MSCs和MSC-exos对受损肌腱细胞的作用。而后,搜寻数据库和文献找到修复肌腱的相关mirNA,通过PCR实验筛选出miR-19a,并通过过表达和敲除miR-19a,来验证miR-19a能够抑制氧化应激并且促进肌腱细胞的增长。紧接着,我们预测并通过纤维素酶实验来证实miR-19a的靶蛋白为IGFBP3,并通过q RT-PCR实验来辅助验证miR-19a可以调控IGFBP3的表达。采用ELISA、MTT、FCM和WB实验来检测IGFBP3对体外肌腱细胞的氧化应激和肌腱细胞增殖情况。最后,体内动物实验,将MSC-exos注射到损伤的肌腱组织,通过HE染色、免疫组织化学实验和WB实验来观察其对损伤肌腱的组织形态的影响和增殖情况。结果研究发现,MSCs和MSC-exos均可抑制氧化应激,并促进从大鼠损伤模型中分离出来的肌腱细胞的增殖。进一步发现MSC-exos能抑制氧化应激和促进肌腱细胞增值其发挥作用的是携带的miR-19a。并且外泌体中的miR-19a通过与IGFBP3的m RNA3‘UTR结合来调节IGFBP3的表达。此外,IGFBP3可促进氧化应激,抑制腱细胞增殖。体内动物实验免疫组织化学和Westernblot的结果表明,损伤+外泌体组中PCNA的相对蛋白量更多,而Caspase-3相比较而言是少的。这些数据表明MSC-exos促进了体内肌腱创面的愈合。结论我们的数据表明,MSC-exos治疗通过抑制氧化应激和促进肌腱细胞增殖来改善肌腱损伤。由MSC-exos携带的miR-19a通过与其3‘UTR结合来调节IGFBP3的表达,最终促进受损的肌腱愈合。

关键词：间充质干细胞(MSCs) 外泌体肌腱损伤 miR-19a 氧化应激

miR-19a promotes epithelial-mesenchymal transition through PI3K/AKT pathway in gastric cancer

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World Journal of Gastroenterology 2015年第15期21卷 4564-4573页

作者： Wei-Dong Lu Yun Zuo Zhen Xu Min Zhang Department of Oncology Zhangjiagang First People’s Hospital Suzhou University

AIM: To investigate the mechanism by which mi R-19 a is up-regulated in gastric cancer(GC), which plays an oncogenic role.METHODS: In the present study, we investigated the role of mi R-19 a in gastric tissues as well as two GC cell lines. In vivo, we detected the basal expression level of mi R-19 a using real-time reverse transcription-PCR(RTPCR), and the relevance between expression of mi R-19 a and clinicopathological information was analyzed.In vitro, mi R-19 a was ectopically expressed using overexpression and knock-down strategies.RESULTS: Overexpression of mi R-19 a was significantly associated with metastasis of GC and inferior overall prognosis. However, no significant correlation was f o u n d b e t w e e n m i R- 1 9 a e x p r e s s i o n a n d o t h e r characteristics such as age, gender, tobacco, alcohol or tumor size. Cell proliferation, migration and invasion assays showed that overexpression of mi R-19 a promoted the proliferation, migration and invasion, and that overexpression of mi R-19 a promoted the epithelialmesenchymal transition through activating the PI3K/AKT pathway. Blocking the PI3K/AKT pathway could cancel the effect of mi R-19 a.CONCLUSION: All together, our results suggest that mi R-19 a could be used as a promising therapeutic target in the treatment of GC.

关键词： Gastric cancer miR-19a PI3K-AKT Epithelialmesenchymaltransition

miR-19a调控血小板反应蛋白在结肠癌淋巴转移中的机制

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华中科技大学学报（医学版） 2019年第1期48卷 42-47页

作者：殷茜王佩佩彭睿周航遵义医科大学附属医院腹部肿瘤科遵义563003

目的探讨miR-19a调控血小板反应蛋白(THBS1)在结肠癌淋巴转移中的机制。方法采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)的方法检测不同结肠癌细胞株(LOVO、HT116、SW480、HT29)中的miR-19a的表达水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)/免疫共沉淀(... 详细信息

目的探讨miR-19a调控血小板反应蛋白(THBS1)在结肠癌淋巴转移中的机制。方法采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)的方法检测不同结肠癌细胞株(LOVO、HT116、SW480、HT29)中的miR-19a的表达水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)/免疫共沉淀(CO-IP)技术检测LOVO与HT29细胞中THBS1及血管内皮生长因子C/D(VEGF-C/D)蛋白结合及表达情况;Western blot法检测转染后细胞中THBS1、VEGF-C/D的表达情况;细胞划痕法检测转染后细胞的迁移能力。取shRNA、shRNA-NC转染后的LOVO细胞以及正常LOVO细胞分别接种于裸鼠皮下,建立裸鼠移植瘤模型观察成瘤情况,免疫组化法检测肿瘤组织中CD34的表达,Western blot法检测瘤体中THBS1、VEGF-C、VEGF-D蛋白的表达。结果细胞株LOVO和HT29的miR-19a的表达量分别为最高和最低;THBS1蛋白在HT29细胞中高表达,VEGF-C/D蛋白在LOVO细胞中高表达;LOVO和HT29细胞中THBS1和VEGF-C免疫共沉淀反应为阳性;转染miR-19a后,LOVO细胞的迁移能力显著下降,而HT29细胞迁移能力有显著上升。注射了mir-NA抑制物组的裸鼠瘤块明显变小;瘤块组织中THBS1的蛋白表达显著上升,VEGF-C的蛋白表达显著下降,CD34的阳性表达降低。结论 miR-19a能够通过下调THBS1促进VEGF-C的表达,从而促进结肠癌淋巴结转移。

关键词： miR-19a THBS1 结肠癌淋巴转移 VEGF-C/D

幽门螺杆菌感染对胃癌组织miR-19a表达的影响

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中华医院感染学杂志 2021年第9期31卷 1296-1300页

作者：张静袁果孙义长李进贾云龙南阳医学高等专科学校第一附属医院检验科河南南阳473000 南阳医学高等专科学校第一附属医院肿瘤放疗科河南南阳473000 南阳医学高等专科学校第一附属医院消化一病区河南南阳473000 南阳医学高等专科学校第一附属医院普胸外科河南南阳473000

目的探讨幽门螺杆菌(Hp)感染对胃癌组织microRNA-19a(miR-19a)表达的影响。方法选择2018年5月-2020年5月在南阳医学高等专科学校第一附属医院接受手术治疗的135例胃癌患者,根据是否存在Hp感染,分为Hp阳性组(n=87)和Hp阴性组(n=48)。记... 详细信息

目的探讨幽门螺杆菌(Hp)感染对胃癌组织microRNA-19a(miR-19a)表达的影响。方法选择2018年5月-2020年5月在南阳医学高等专科学校第一附属医院接受手术治疗的135例胃癌患者,根据是否存在Hp感染,分为Hp阳性组(n=87)和Hp阴性组(n=48)。记录患者年龄、肿瘤直径、分化程度、TNM分期、浸润深度和淋巴结转移等临床特征。术前检测血清白细胞介素6(IL-6)、IL-8、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、C-反应蛋白(CRP)水平。荧光定量PCR检测癌组织miR-19a水平,蛋白印迹法(WB)检测Ki67、周期蛋白依赖性激酶1(CDK1)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP-2)、核因子κB(NF-κB)和磷酸化NF-κB(p-NF-κB)蛋白表达。结果胃癌患者Hp阳性与肿瘤TNM分期、浸润深度和淋巴结转移有关(PmiR-19a水平均高于Hp阴性组(PmiR-19a水平与肿瘤TNM分期、浸润深度和淋巴结转移有关(PmiR-19a表达,激活NF-кB信号通路,促进胃癌细胞的增殖和侵袭,促进胃癌的恶性进展。

关键词：胃癌幽门螺杆菌 miR-19a 增殖侵袭

miR-19a对慢性压迫性损伤大鼠神经病理性疼痛的影响及其机制

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第三军医大学学报 2018年第7期40卷 590-595页

作者：梁冰董铁立河南中医药大学第一附属医院麻醉科郑州450099 郑州大学第二附属医院麻醉科郑州450014

目的观察miR-19a对慢性压迫性损伤(chronic constriction injury,CCI)大鼠神经病理性疼痛的作用,并探讨其潜在机制。方法 75只雄性SD大鼠按随机数字表法分为3组:假手术组,行假手术;CCI组,坐骨神经结扎法构建CCI大鼠模型;CCI+inhibitor组... 详细信息

目的观察miR-19a对慢性压迫性损伤(chronic constriction injury,CCI)大鼠神经病理性疼痛的作用,并探讨其潜在机制。方法 75只雄性SD大鼠按随机数字表法分为3组:假手术组,行假手术;CCI组,坐骨神经结扎法构建CCI大鼠模型;CCI+inhibitor组,CCI大鼠鞘内注射miR-19a inhibitor。于术前当天(0 d)和术后3、7、14、21 d观察机械缩足反射阈值(mechanical withdrawal threshold,MWT)和热刺激反射潜伏期(thermal withdrawal latency,TWL)的变化。采用RT-qPCR检测腰椎脊髓中促炎因子IL-6、TNF-α、IL-1βmRNA及JAK2和STAT3表达的变化,Western blot检测SOCS3蛋白水平的表达,荧光素酶报告基因技术验证miR-19a的靶基因。结果与假手术组比较,CCI组大鼠脊髓的miR-19a表达显著上升(PmiR-19a的靶基因。Western blot检测结果表明CCI组大鼠脊髓中SOCS3水平较假手术组升高,且SOCS3水平在CCI术后第7天达到最高,而后呈下降趋势;与CCI组比较,CCI+inhibitor组SOCS3表达明显上升(PmiR-19a inhibitor能缓解CCI大鼠机械性触诱发痛和热痛觉过敏,该作用与SOCS3介导的JAK2/STAT3通路有关。

关键词： miR-19a 慢性压迫性损伤 SOCS3 机械性触诱发痛热痛觉过敏大鼠

miR-19a通过抑制c-MET的表达逆转HCC827细胞吉非替尼耐药

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华中科技大学学报（医学版） 2019年第2期48卷 168-171页

作者：来森艳曹小年吴维李国东胡发涌罗学来华中科技大学同济医学院附属同济医院胃肠外科武汉430030 华中科技大学同济医学院附属同济医院胸外科武汉430030

目的明确miR-19a在调控HCC827细胞吉非替尼耐药中的作用及机制,探索miR-19a作为非小细胞肺癌(NSCLC)患者吉非替尼耐药新靶点的理论依据。方法收集非小细胞肺癌患者15例在吉非替尼耐药前后的外周血,通过Real-time PCR检测其中miR-19a的表... 详细信息

目的明确miR-19a在调控HCC827细胞吉非替尼耐药中的作用及机制,探索miR-19a作为非小细胞肺癌(NSCLC)患者吉非替尼耐药新靶点的理论依据。方法收集非小细胞肺癌患者15例在吉非替尼耐药前后的外周血,通过Real-time PCR检测其中miR-19a的表达;在吉非替尼敏感的HCC827细胞中降低miR-19a表达,并加入吉非替尼,通过CCK8法检测其对细胞活力的影响;在构建成功的HCC827吉非替尼耐药细胞株(HCC827GR)中过表达miR-19a,并加入吉非替尼,通过CCK8法检测其对细胞活力的影响;在HCC827及HCC827GR细胞中分别降低或过表达miR-19a,通过Western blot检测c-MET蛋白表达水平;在HCC827细胞中同时降低miR-19a和c-MET表达,并加入不同浓度吉非替尼,通过CCK8法检测各组细胞活力。结果在吉非替尼耐药的NSCLC患者外周血中,miR-19a呈明显低表达状态;在HCC827细胞中降低miR-19a表达,吉非替尼对细胞活力的抑制效果明显下降(PmiR-19a,吉非替尼对细胞活力的抑制效果明显增强(PmiR-19a表达,能明显促进c-MET蛋白的表达;相反,在HCC827GR细胞中过表达miR-19a,则明显抑制c-MET蛋白的表达;在HCC827细胞中同时降低miR-19a和c-MET表达,并加入不同浓度的吉非替尼,低表达c-MET能够抵消miR-19a对细胞活力的影响。结论 miR-19a在非小细胞肺癌细胞HCC827吉非替尼耐药中发挥着重要作用,其机制可能是通过抑制c-MET蛋白水平的表达。

关键词： HCC827细胞 miR-19a 吉非替尼耐药 c-MET

肝细胞肝癌中miR-19a与PTEN基因表达及意义临床研究

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中国实用内科杂志 2018年第A02期38卷 61-63页

作者：王红芳余细球叶静深圳市罗湖区人民医院消化内科广州深圳518000 北京大学深圳医院中心实验室广州深圳518000

目的通过检测miR-19a与其靶基因PTEN在肝癌组织中表达情况,探讨其在肝癌发病中的作用。方法采用荧光定量PCR技术检测miR-19a和PTEN基因在肝细胞肝癌和癌旁正常组织中转录表达水平。结果基因表达相对量采用癌症组/非癌组=2-△△CT进行数... 详细信息

目的通过检测miR-19a与其靶基因PTEN在肝癌组织中表达情况,探讨其在肝癌发病中的作用。方法采用荧光定量PCR技术检测miR-19a和PTEN基因在肝细胞肝癌和癌旁正常组织中转录表达水平。结果基因表达相对量采用癌症组/非癌组=2-△△CT进行数据分析,肝细胞癌组织中基因表达水平与癌旁正常组织相比,miR-19a表达增加,PTEN基因表达下降,差异均有统计学意义(PmiR-19a在肝细胞肝癌中作为癌基因发挥作用,可以负性调节PTEN基因的表达。

关键词：肝细胞肝癌 miR-19a PTEN