人碱性成纤维细胞生长因子基因真核表达质粒的构建

作     者：胡大海 陈璧 汤朝武 苏映军 惠宏襄 阎小君 贾赤宇 徐明达 HU Da-Hai;CHEN Bi;TANG Chao-Wu;SU Ying-Jun;HUI Hong-Xiang;YAN Xiao-Jun;JIA Chi-Yu;XU Ming-Da

作者机构：第四军医大学 

出 版 物：《第四军医大学学报》 (Journal of the Fourth Military Medical University)

年 卷 期：1999年第20卷第5期

页      面：399-403页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家自然科学基金 

主　　题：hbFGF 真核表达质粒 构建 

摘      要：目的：构建人碱性成纤维细胞生长因子（ｈｂＦＧＦ）基因真核表达质粒，为深入研究ｈｂＦＧＦ在组织修复中的分子调节机制及临床应用提供物质基础．方法：含ｈｂＦＧＦｃＤＮＡ的ｐＵＣ１８－ｈｂＦＧＦ质粒于大肠杆菌ＪＭ１０９内扩增；提取及纯化ｐＵＣ１８－ｈｂＦＧＦ质粒；经ＤＮＡ序列分析所含ｈｂＦＧＦｃＤＮＡ；限制性酶切ｈｂＦＧＦｃＤＮＡ片段，连接酶连接到真核表达质粒ｐｃＤＮＡ３－ｎｅｏ内，克隆出真核表达质粒ｐｃＤＮＡ３－ｈｂＦＧＦ．结果：提取及纯化的ｐＵＣ１８－ｈｂＦＧＦ质粒含有大小正确的ｈｂＦＧＦｃＤＮＡ碱基片段，其碱基序列为编码目的基因的正确序列；凝胶电泳结果证明已将此片段正确地克隆到ｐｃＤＮＡ３－ｈｂＦＧＦ内．结论：成功地构建了ｈｂＦＧＦ基因的真核表达质粒ｐｃＤＮＡ３－ｈｂＦＧＦ．