RT-PCR方法检测单核细胞增生李斯特活菌研究

作     者：李善志 吴清平 张菊梅 郭伟鹏 Li Shan-zhi;Wu Qing-ping;Zhang Ju-mei;Guo Wei-peng

作者机构：广东省微生物研究所广东省菌种保藏与应用重点实验室 

出 版 物：《中国卫生检验杂志》 (Chinese Journal of Health Laboratory Technology)

年 卷 期：2006年第16卷第6期

页      面：641-643页

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100103[医学-病原生物学] 10[医学] 

基　　金：广东省科技计划资助项目(2005B10401023) 

主　　题：mRNA RT—PCR 单核细胞增生李斯特菌 活菌检测 hlyA基因 

摘      要：目的：建立单核细胞增生李斯特活菌快速检测技术，解决PCR带来的假阳性问题。方法：采用以mRNA为基础的RT—PCR方法对单核细胞增生李斯特氏菌的hlyA基因进行检测，设计引物，扩增，并作了特异性和灵敏度比较。结果：该引物能较好地扩增单核细胞增生李斯特菌的特异性片断，而对其它的李斯特菌以及常见食源性致病菌无特异性扩增条带；检测的灵敏度纯菌可达到1×10^4cfu／ml，人工污染样品猪肉、虾肉和牛奶等培养12—16h，可达4．5cfu／ml（g）。结论：可以应用该方法对样品中单核细胞增生李斯特活菌进行检测，能较好地解决PCR检测所带来的假阳性问题。