猪流行性腹泻病毒细胞适应毒LJB-03株在三种Vero细胞上增殖效果的比较

作     者：郭卫龙 解伟纯 侯星宇 李智力 姜艳平 崔文 王丽 乔薪瑗 周晗 徐义刚 李一经 唐丽杰 GUO Wei-long;XIE Wei-chun;HOU Xing-yu;LI Zhi-li;JIANG Yan-ping;CUI Wen;WANG Li;QIAO Xin-yuan;ZHOU Han;XU Yi-gang;LI Yi-jing;JANG Li-jie

作者机构：东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030 上海源培生物科技股份有限公司上海201499 

出 版 物：《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期：2019年第49卷第3期

页      面：301-308页

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金："十三五"国家重点研发计划项目(2017YFD0501105) 国家自然科学基金资助项目(31472226) 

主　　题：猪流行性腹泻病毒 细胞适应毒 Vero细胞 增殖 

摘      要：为探究猪流行性腹泻病毒(PEDV)细胞适应毒LJB-03株在3种Vero细胞上的增殖特性,分别以正常Vero细胞、适应无血清培养基的Vero细胞和稳定表达跨膜丝氨酸蛋白酶2 (TMPRSS2)的Vero/TMPRSS2细胞(繁殖PEDV时无须添加胰酶)为宿主细胞,繁殖PEDV LJB-03株,观察这3种细胞接毒后的病变特点和病变时间,利用空斑法比较其增殖特性,并以间接免疫荧光和电镜技术鉴定病毒的增殖。结果表明,PEDV LJB-03株在正常Vero细胞和适应无血清培养基的Vero细胞上增殖时需添加的胰酶最佳质量浓度为7ug/m L;在这3种细胞上增殖时的最佳感染复数均为0.01;PEDV LJB-03株在3种细胞上效价达到峰值的时间均为36 h,其中在正常Vero细胞上病毒效价最高为7.17×10~7PFU/m L,在Vero/TMPRSS2细胞上病毒效价为3.33×10~7PFU/m L,在无血清Vero细胞上的病毒效价为2.85×10~7PFU/m L。综上所述,正常Vero细胞上PEDV LJB-03株的病毒效价可达其他2种细胞的2倍以上,但在培养病毒时正常Vero细胞需添加胰酶和血清,因此,适应无血清培养基的Vero细胞与Vero/TMPRSS2细胞在培养PEDV LJB-03株时更具有潜力。