脊髓脂质运载蛋白-2对大鼠吗啡耐受形成的影响

作     者：王芬 刘清珍 刘健 江姿潞 谢滔 李伟彦 WANG Fen;LIU Qing-zhen;LIU Jian;JIANG Zi-lu;XIE Tao;LI Wei-yan

作者机构：徐州医学院江苏省麻醉学重点实验室 徐州医学院江苏省麻醉与镇痛应用技术重点实验室江苏徐州221004 南京军区南京总医院麻醉科江苏南京210002 第二军医大学研究生院上海200433 

出 版 物：《中国药理学通报》 (Chinese Pharmacological Bulletin)

年 卷 期：2015年第31卷第4期

页      面：565-569页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 07[理学] 071006[理学-神经生物学] 10[医学] 

基　　金：江苏省自然科学基金面上研究项目(No BK20131328) 

主　　题：吗啡耐受 脂质运载蛋白-2 小干扰RNA 小胶质细胞 磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶 脊髓 

摘      要：目的 探索用RNA干扰（RNAi）法沉默脊髓脂质运载蛋白-2（lipocalin-2,LCN2）的表达及其对正常大鼠吗啡耐受形成的影响。方法 鞘内置管成功的♂SD大鼠48只,体质量180～220g,随机均分为4组,每组12只：Ⅰ组对照组、Ⅱ组吗啡耐受组、Ⅲ组错义小干扰RNA（mismatch siRNA,MMsiRNA）组、Ⅳ组LCN2小干扰RNA（LCN2siRNA）组。所有大鼠鞘内置管术后d6确定导管位置,记为d0。d2～8连续7d,每天2次进行皮下注射,每次注射剂量10μg.g-1,Ⅰ组大鼠皮下注射生理盐水（normal saline,NS）,Ⅱ-Ⅳ组大鼠皮下注射吗啡建立吗啡耐受模型。各组大鼠每天皮下给药前分别鞘内注射10μLDEPC溶液、10μLDEPC溶液、10μL含4μgMM siRNA的DEPC溶液和10μL含4μgLCN2siRNA的DEPC溶液。d1、d9,测定所有大鼠的基础热缩足反应潜伏期（paw withdrawal thermal latency,PWTL）及皮下注射吗啡后45min的PWTL,并计算吗啡的最大可能镇痛效应百分比值（%maximal possible effect,%MPE）。d9行为学测试结束后,取脊髓腰膨大,用Western blot法检测磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶（p-p38MAPK）及LCN2蛋白表达水平,用免疫组织荧光染色法检测小胶质细胞标记物Iba1的表达。结果 d9,与Ⅰ组比,Ⅱ、Ⅲ组大鼠%MPE值明显下降（P〈0.05）,腰段脊髓LCN2、p-p38MAPK、Iba1表达明显增加（P〈0.05）。与Ⅱ组比,Ⅳ组大鼠的%MPE值明显增加（P〈0.05）,脊髓LCN2、p-p38MAPK、Iba1表达明显下降（P〈0.05）。结论 鞘内注射LCN2siRNA沉默脊髓LCN2的表达能够部分抑制吗啡耐受的形成,该现象可能与其抑制脊髓背角小胶质细胞的活化及脊髓p-p38MAPK的表达有关。