僧帽牡蛎碱性磷酸酶性质的研究

作     者：陈巧 陈清西 林建城 廖金花 CHEN Qiao, CHEN Qing-xi, LIN Jian-cheng, LIAO Jin-hua(The Key Laboratory of Ministry of Education for Cell Biology and Tumor Cell Engineering, School of Life Sciences, Xiamen University, Xiamen 361005, China)

作者机构：厦门大学生命科学学院教育部细胞生物学与肿瘤细胞工程重点实验室福建厦门361005 

出 版 物：《台湾海峡》 (Journal of Oceanography In Taiwan Strait)

年 卷 期：2003年第22卷第4期

页      面：475-481页

学科分类：0710[理学-生物学] 071010[理学-生物化学与分子生物学] 081704[工学-应用化学] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术] 071002[理学-动物学] 

基　　金：教育部留学回国人员科研启动资助项目[教外师留(2002)247号] 

主　　题：僧帽牡蛎 碱性磷酸酶 热稳定性 金属离子 抑制剂 海洋生物 

摘      要：从僧帽牡蛎分离纯化出一种碱性磷酸酶,采用Sephadex G-200凝胶过滤柱层析法测得该酶分子量为1.57×10~5.以对硝基苯磷酸为底物,该酶的最适温度为43℃,最适pH值为10.0.在37℃和pH值为10.0的条件下,酶催化反应的米氏常数(K_m)为9.68×10^(-4)mol/dm^3,活化能(E_a)为45.85kJ/mol,温度系数(Q_(10))为1.80(30～40℃).对该酶的热稳定性研究表明:其在45℃以下较为稳定,50℃以上明显失活,并测定了该酶的热失活速度常数.金属离子对酶活力的效应研究结果表明:Mg^(2+)、Mn^(2+)、Ca^(2+)、Co^(2+)对酶有激活作用,Ag^+、Hg^(2+)、Zn^(2+)表现为抑制作用,Cd^(2+)几乎没有影响.Mg^(2+)是较有效的激活剂,表现为部分非竞争性效应,激活常数(K_a)为2.48×10^(-4)mol/dm^3,有Mg^(2+)存在时该酶活性中心的转换数量是无Mg^(2+)时的4.0倍.几种效应物对酶的抑制机理研究表明:HPO_4^(2-)、HAsO_4^(2-)、Cys为竞争性,其抑制常数分别为1.61、1.18和0.15mmol/dm^3;L-Phe为反竞争性,抑制常数为3.26mmol/dm^3.