磺胺二甲嘧啶单克隆抗体的制备及其鉴定
Preparation and Identification of Monoclonal Antibody against Sulfadimidine作者机构:黑龙江八一农垦大学食品学院食品科学教研室黑龙江大庆163319 吉林大学教育部人兽共患病重点实验室细菌室长春130062 黑龙江八一农垦大学生命科技学院黑龙江大庆163319 中国农业大学食品学院北京100083
出 版 物:《中国生物制品学杂志》 (Chinese Journal of Biologicals)
年 卷 期:2011年第24卷第7期
页 面:835-838页
核心收录:
学科分类:0710[理学-生物学] 0831[工学-生物医学工程(可授工学、理学、医学学位)] 1002[医学-临床医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 0703[理学-化学] 0836[工学-生物工程] 10[医学]
基 金:国家自然科学基金资助课题(30671762 31000790)
摘 要:目的制备磺胺二甲嘧(Sulfadimidine,SM2)啶单克隆抗体,并对其进行鉴定。方法经小鼠腹腔免疫SM2-BSA抗原,采用常规技术进行细胞融合,间接竞争ELISA法筛选阳性杂交瘤细胞株,有限稀释法进行亚克隆,硫酸铵-辛酸法纯化抗体,并鉴定其抗体效价、杂交瘤细胞染色体数量、相对分子质量、抗体亚型、亲和力和特异性。结果筛选到1株稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株3D7,细胞培养液上清和抗体效价分别为1∶6.4×102和1∶1.28×105;纯化后3D7抗体效价1∶128 000,杂交瘤细胞染色体平均数为50±2对,分泌的抗体属于IgG1亚类,相对分子质量为164 280,亲和常数为6.09×108 M-1,与6种磺胺类药物及青霉素、庆大霉素和泰乐霉素交叉反应IC50大于1 mg/ml,交叉反应率小于0.01%。结论已成功制备了SM2单克隆抗体,该抗体能满足建立免疫学检测方法的需要。