Hsa-miR-15a/16-1靶向抑制Bcl-2基因对鼻咽癌CNE-2细胞的抑制作用

作     者：张春鸿 方潇碧 林森 黄亚 施清圆 吴丽萍 黄振校 蒋磊 谭映霞 廖志苏 ZHANG Chunhong;FANG Xiaobi;LIN Sen;HUANG Ya;SHI Qingyuan;WU Liping;HUANG Zhenxiao;JIANG Lei;TAN Yingxia;LIAO Zhisu

作者机构：温州医学院附属第一医院耳鼻咽喉科浙江温州325000 温州市第八人民医院耳鼻咽喉科浙江温州325000 温州医学院附属第一医院医学科学研究所浙江温州325000 

出 版 物：《中国耳鼻咽喉头颈外科》 (Chinese Archives of Otolaryngology-Head and Neck Surgery)

年 卷 期：2011年第18卷第10期

页      面：516-520页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：浙江省科技计划项目(2010C34005) 浙江省温州市科技计划项目(Y20090044) 浙江省温州市鹿城区科技计划项目(S090103)联合资助 

主　　题：鼻咽肿瘤 转染 细胞凋亡 流式细胞术 

摘      要：目的观察Hsa-miR-15a/16-1靶向抑制B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(B-cell lymphoma gene 2,Bcl-2gene)表达对鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)CNE-2细胞的生长抑制作用。方法将构建成功的重组质粒pENTR-CMV-EGFP-hsa-mir-15a/16-1经Lipofectamine 2000转染CNE-2细胞,RT-qPCR检测miR-15a/16-1、Bcl-2 mRNA表达水平,流式细胞术和WesternBlot检测Bcl-2、caspase-3蛋白表达水平,CCK-8法分析细胞生长抑制情况,4,6-二脒基-2-苯基吲哚(4,6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)染色观察细胞凋亡状况。结果转染后miR-15a表达增高(F=547.525,P均0.05);Bcl-2蛋白表达下调,caspase-3蛋白表达增高;细胞在体外凋亡明显;细胞增殖受到抑制,作用呈明显的时效关系。结论 Hsa-miR-15a/16-1对Bcl-2基因的靶向抑制,可体外对CNE-2细胞产生增殖抑制和促进凋亡作用。