人可溶性CD40L cDNA的克隆及表达
Cloning of human sCD40L cDNA and construction of vector for expression in E. coli作者机构：第三军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室重庆400038
出 版 物：《第四军医大学学报》 (Journal of the Fourth Military Medical University)
年 卷 期：2006年第27卷第7期
页 面：627-629页
学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种]
摘 要：目的:利用基因技术克隆CD40L分子的胞外区184～831片断cDNA,构建其原核表达载体,从而建立原核表达体系.方法:采用RTPCR方法从人扁桃体的总RNA中扩增CD40L分子184～831片断的cDNA,以限制性酶切和DNA测序进行鉴定,并将目的片断克隆至原核表达载体pET28a+,让重组质粒在BL21中表达,利用Westernblot鉴定目的蛋白.结果:克隆到人sCD40L分子184～831片断的cDNA,DNA测序结果与报道的完全一致;构建了该片断的原核表达载体,且目的蛋白能在BL21中表达.结论:成功克隆人sCD40L分子184～831片断的cDNA并构建了其原核表达载体.在BL21中成功表达了目的蛋白.
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