可溶性人sPD-L1及其抗体的制备和鉴定

作     者：徐丽慧 迟晓云 李丰耀 贾仟涛 查庆兵 何贤辉 XU Li-Hui;CHI Xiao-Yun;LI Feng-Yao;JIA Qian-Tao;ZHA Qing-Bing;HE Xian-Hui

作者机构：暨南大学生命科学技术学院组织移植与免疫实验中心 

出 版 物：《生物工程学报》 (Chinese Journal of Biotechnology)

年 卷 期：2007年第23卷第1期

页      面：106-111页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家自然科学基金(No.30572199和30371651)资助项目~~ 

主　　题：PD-L1 原核表达 重折叠 亲和层析 抗体 

摘      要：通过固定化金属离子亲和层析进行柱上复性与纯化,获得高纯度的可溶性PD-L1胞外域(sPD-L1),其纯度达95%,纯化的sPD-L1经免疫印迹分析得到验证,并具有与其受体PD-1的特异性结合活性;以该抗原免疫小鼠获得高滴度的抗血清,并以制备的sPD-L1-HiTrap亲和层析柱纯化获得高纯度特异性抗体;将该抗体与另一商业化抗体结合建立了一种灵敏的双夹心ELISA法,检测范围为1ng/mL^100ng/mL,可用于分析可溶性PD-L1的含量。可溶性sPD-L1及其抗体的制备不仅可用于人体内特异性抗体和可溶性PD-L1的检测,同时也为进一步研究其体内外活性及其受体的性质提供了条件。