小鼠白细胞介素5真核表达质粒pVAX-1mIL-5的构建及其体外表达

作     者：何柳媚 潘善培 谢琪璇 肖銮娟 彭雅琳 董志炜 HE Liu-mei;PAN Shan-pei;XIE Qi-xuan;XIAO Luan-juan;PENG Ya-lin;DONG Zhi-wei

作者机构：暨南大学生殖免疫研究所广州510632 

出 版 物：《生殖医学杂志》 (Journal of Reproductive Medicine)

年 卷 期：2005年第14卷第2期

页      面：78-82页

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30370541 30230350) 

主　　题：白细胞介素5 质粒构建 体外表达 黏膜免疫 佐剂 

摘      要：目的构建能表达小鼠白细胞介素5(mIL-5)的质粒并鉴定其蛋白的体外瞬时表达。方法以含有mIL-5cDNA序列的质粒为模板,通过聚合酶链反应(PCR)扩增获得小鼠IL-5基因片段后,定向插入真核表达载体pVAX1中,获得重组表达质粒pVAX1mIL-5。通过双酶切、PCR及插入片段序列测定对质粒进行鉴定。采用间接免疫荧光技术检测pVAX1mIL-5在HeLa细胞的瞬时表达。结果酶切、PCR及测序鉴定证实,插入片段正确,间接免疫荧光检测表明其可以在HeLa细胞中瞬时表达。结论构建的真核表达质粒pVAX1mIL-5可以在HeLa细胞中瞬时表达小鼠IL-5的蛋白,为下一步利用IL-5作为DNA疫苗黏膜免疫佐剂研究奠定了基础。