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人类体外受精及胎胚移植技术的研究和应用

暨南大学学报（自然科学与医学版） 1989年第1期10卷 90-95页

作者：潘善培暨南大学生殖免疫研究中心

人类体外受精及胚胎移植(In Vitro Fertilization and Embryo Tiansfer)是近十年来兴起的一项生殖工程技术,它是从体内采集配子,在体外受精并培育成早期卵裂阶段胚胎,再移植入母体子宫内发育成胎儿的,俗称试管婴儿技术,简称IVF-ET或IVF... 详细信息

人类体外受精及胚胎移植(In Vitro Fertilization and Embryo Tiansfer)是近十年来兴起的一项生殖工程技术,它是从体内采集配子,在体外受精并培育成早期卵裂阶段胚胎,再移植入母体子宫内发育成胎儿的,俗称试管婴儿技术,简称IVF-ET或IVF技术。 IVF—ET技术的诞生开创了人类生殖技术的新时代,是医学和生物学技术的一次伟大的革命。这项技术不仅为不孕患者提供了一种新的治疗方法。

关键词：人类生殖体外受精胚胎移植

影响人类体外受精——胚胎移植成功率的某些因素分析

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 1991年第1期12卷 96-102页

作者：潘善培暨南大学生殖免疫研究中心

对137例采用hMG/hCG超排的IVF-ET的结果,分析比较了采卵时不同成熟度卵子的受精率、妊娠组与非妊娠组采卵时卵子的成熟度分布、采卵数、移植时胚胎发育阶段及移植胚胎数等差异。结果表明,采卵时成熟的卵子受精率较高,接近成熟卵子的受... 详细信息

对137例采用hMG/hCG超排的IVF-ET的结果,分析比较了采卵时不同成熟度卵子的受精率、妊娠组与非妊娠组采卵时卵子的成熟度分布、采卵数、移植时胚胎发育阶段及移植胚胎数等差异。结果表明,采卵时成熟的卵子受精率较高,接近成熟卵子的受精率略低,未成熟卵子的受精率最低,仅达14％左右。妊娠组和非妊娠组卵子成熟度分布无显著差别(P>0.05),但妊娠组平均采卵数显著高于非妊娠组(P0.05),妊娠组可供移植胚胎数显著高于非妊娠组(P<0.01)。

关键词：人类体外受精胚胎移植成功率

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人巨细胞病毒重组基因表达质粒的构建

第三军医大学学报 2002年第6期24卷 716-718页

作者：郑育声谢琪璇潘善培芦春斌肖銮娟暨南大学生殖免疫研究中心广州510632

目的　用基因工程技术克隆人巨细胞病毒 (Humancytomegalovirus ,HCMV)中抗原性较强的蛋白片段—gp5 2C末端和pp15 0C末端的DNA序列 ,插入pPIC9K质粒 ,构建适于酵母表达系统的重组表达质粒。方法　根据人巨细胞病毒糖蛋白gp5 2和磷酸蛋... 详细信息

目的　用基因工程技术克隆人巨细胞病毒 (Humancytomegalovirus ,HCMV)中抗原性较强的蛋白片段—gp5 2C末端和pp15 0C末端的DNA序列 ,插入pPIC9K质粒 ,构建适于酵母表达系统的重组表达质粒。方法　根据人巨细胞病毒糖蛋白gp5 2和磷酸蛋白pp15 0C末端的cDNA序列 ,设计出 2对引物。利用PCR的方法 ,以病毒培养液上清为模板 ,进行二轮PCR扩增 ,把两个目的基因串联在一起 ,将所得的DNA片段经EcoRⅠ和NotⅠ双酶切后用T4连接酶与pPIC9K质粒进行连接 ,然后导入大肠杆菌DH5α ,筛选出阳性转化子 ,并用PCR和双酶切鉴定阳性重组子。结果　从人巨细胞病毒培养液上清中扩增出目的基因 ,PCR反应和双酶切鉴定结果与预期相符。

关键词：基因表达人巨细胞病毒重组PCR 质粒pPIC9K

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生殖内分泌学原理与临床应用

生殖内分泌学原理与临床应用

人类绒毛膜促性腺激素（hCG）避孕疫苗研究概况（综述）

1988年

作者： Bruno Lunenfeld 刘学高潘善培朱伟杰译

来源：汇雅图书（南通市图书馆... 评论

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汇雅图书（南通市图书馆）

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 1994年第3期15卷 110-117页

作者：潘善培刘学高暨南大学生殖免疫研究中心

人类绒毛膜促性腺激素（ｈＣＧ）避孕疫苗研究概况（综述）潘善培，刘学高（暨南大学生殖免疫研究中心，５１０６３２，广州）控制人口的过速增长、实行计划生育是我国的基本国策。发展安全、有效、使用方便、易为用者接受的避孕技术和... 详细信息

人类绒毛膜促性腺激素（ｈＣＧ）避孕疫苗研究概况（综述）潘善培，刘学高（暨南大学生殖免疫研究中心，５１０６３２，广州）控制人口的过速增长、实行计划生育是我国的基本国策。发展安全、有效、使用方便、易为用者接受的避孕技术和方法是实施计划生育的重要保证。目前...

关键词： hCG 避孕疫苗

重组质粒pPIC9K-oLHαhCGβCTP的构建及在毕赤酵母中的表达

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中国生物化学与分子生物学报 1999年第2期15卷 175-178页

作者：王桂玉刘润梅潘善培李伟雄国家计划生育委员会科学技术研究所分子生物室暨南大学生殖免疫研究所

将人绒毛膜促性腺激素β－亚基的羧基肽（ＣＴＰ）与羊黄体生成素（ｏＬＨ）的α－亚基融合，通过设计两对引物，用部分重叠聚合酶链式反应（ｏｖｅｒｌａｐｐｉｎｇＰＣＲ）的方法构建了羊的α亚基ＣＴＰ嵌合体．这个嵌合体被克隆到ｐ... 详细信息

将人绒毛膜促性腺激素β－亚基的羧基肽（ＣＴＰ）与羊黄体生成素（ｏＬＨ）的α－亚基融合，通过设计两对引物，用部分重叠聚合酶链式反应（ｏｖｅｒｌａｐｐｉｎｇＰＣＲ）的方法构建了羊的α亚基ＣＴＰ嵌合体．这个嵌合体被克隆到ｐＰＩＣ９Ｋ质粒中，用电打孔方法转入巴氏毕赤酵母（Ｐｉｃｈｉａｐａｓｔｏｒｉｓ），并获高效表达．表达蛋白经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹证明分子量约为２８ｋＤ．２．５Ｌ发酵罐大量培养，产量可达２．０ｇ／Ｌ．

关键词： HCG PCR 部分重叠巴氏毕赤酵母基因表达

小鼠附睾特异性辅脂酶的原核表达及其抗体的制备

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2010年第2期31卷 105-110页

作者：关艺青禹艳红黄丹潘善培暨南大学生命科学技术学院生殖免疫研究所广东广州510632

目的:利用原核表达系统重组表达小鼠附睾特异性辅脂酶(meClps),并制备抗meClps抗体。方法:通过生物信息分析meClps蛋白结构,Oligo 6设计引物,PCR法从小鼠附睾cDNA中扩增meClps全长序列并克隆到pMD19-T载体中。将含meClps序列pMD19-T载... 详细信息

目的:利用原核表达系统重组表达小鼠附睾特异性辅脂酶(meClps),并制备抗meClps抗体。方法:通过生物信息分析meClps蛋白结构,Oligo 6设计引物,PCR法从小鼠附睾cDNA中扩增meClps全长序列并克隆到pMD19-T载体中。将含meClps序列pMD19-T载体通过PCR扩增成熟肽区段序列,重组到pET-21b原核表达载体上,经菌落PCR及测序鉴定后,转化到表达菌株***21(DE3),经IPTG诱导蛋白表达后用Tricine-SDS-PAGE和Western blotting检测重组meClps的表达。包涵体沉淀经浓度为2 mol/L尿素洗涤,Tricine-SDS-PAGE分离、染色、脱色,切下目的条带用生理盐水浸泡、磨碎与弗氏佐剂混合后免疫新西兰大白兔获取免疫血清,Western blotting检测抗体与meClps反应。结果:在原核表达系统成功重组表达meClps,目的蛋白主要以包涵体形式存在,制备了高效价的兔抗meClps抗体。结论:成功建立meClps的原核表达系统和获得兔抗meClps抗体。

关键词：附睾辅脂酶原核表达抗体

构建重组人CatSper1特异抗原原核表达载体

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2010年第2期31卷 130-135页

作者：黄丹潘善培关艺青禹艳红暨南大学生命科学技术学院生殖免疫研究所广东广州510632

目的:构建重组人Catsper1特异抗原(含胞外区、钙选择孔区和破伤风类毒素通用T细胞表位TT580-599)原核表达载体并表达重组抗原。方法:设计引物,以RT-PCR法扩增人CatSper1的整个跨膜区DNA片段,利用重叠PCR方法合成重组人CatSper1特异抗原... 详细信息

目的:构建重组人Catsper1特异抗原(含胞外区、钙选择孔区和破伤风类毒素通用T细胞表位TT580-599)原核表达载体并表达重组抗原。方法:设计引物,以RT-PCR法扩增人CatSper1的整个跨膜区DNA片段,利用重叠PCR方法合成重组人CatSper1特异抗原DNA片段,并插入到pET-21b和pET-21b-Trx(硫氧还蛋白)的原核表达载体。测序鉴定后转化工程菌株***21(DE3)进行诱导表达,并纯化表达的重组蛋白。用Tricine-SDS-PAGE和Western blotting分析重组蛋白的表达情况。结果:成功构建pET-21b-Catsper1特异抗原和pET-21b-Trx-Catsper1特异抗原原核表达载体,并在BL21(DE3)中诱导表达重组蛋白。Tricine-SDS-PAGE和Western blotting鉴定表明,已获得重组人CatSper1特异抗原包涵体和纯化的可溶重组Trx-Catsper1特异抗原。结论:成功在原核表达系统表达重组人Catsper1特异抗原。

关键词： CatSper1 精子免疫避孕重叠PCR 原核表达

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一步性冷冻解冻法保存小鼠胚胎初探

暨南大学学报（自然科学与医学版） 1992年第1期13卷 98-102页

作者：曹佐武潘善培刘学高暨南大学生殖免疫研究中心

对不同胚龄(2,4和多细胞期)的小鼠胚胎的一步性冷冻保存效果做了实验比较。用不同比例的甘油和1,2-丙二醇为冷冻保护剂,蔗糖为解冻稀释液,以37℃,5％CO_2条件下能发育到囊胚期为胚胎保持正常生命力的指标。结果表明,在所用的不同组合的... 详细信息

对不同胚龄(2,4和多细胞期)的小鼠胚胎的一步性冷冻保存效果做了实验比较。用不同比例的甘油和1,2-丙二醇为冷冻保护剂,蔗糖为解冻稀释液,以37℃,5％CO_2条件下能发育到囊胚期为胚胎保持正常生命力的指标。结果表明,在所用的不同组合的保护剂中,含2.5mol/L甘油和3.5mol/L 1,2—丙二醇的CP5效果最好。以它作冷冻保护剂一步性液氮保存多细胞期(指8～16细胞期或稍晚)胚胎,35℃水浴解冻后,平均有37.8％的发育至囊胚。用此法保存4细胞和2细胞期小鼠胚胎效果差。25℃和15℃水浴解冻也明显不如35℃解冻效果好。

关键词：冷冻保护剂冷冻解冻法胚胎保存