大豆中NBS类抗病基因同源序列的分离与鉴定

作     者：贺超英 张志永 陈受宜 

作者机构：中国科学院遗传研究所植物生物技术开放实验室北京100101 

出 版 物：《科学通报》 (Chinese Science Bulletin)

年 卷 期：2001年第46卷第12期

页      面：1017-1021页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家973计划 

主　　题：大豆 NBS结构域 抗病基因同源序列 连锁群定位 抗病机制 基因克隆 序列分离 

摘      要：植物抗病基因的克隆研究对于植物抗病育种和抗病机制的理解具有重要意义．根据预测结构域可将已知植物抗病基因分为 ４类，其中以 ＮＢＳ（ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ ｂｉｎｄｉｎｇ ｓｉｔｅ）结构域为主． ＮＢＳ结构域包括 Ｐ Ｗ（激酶１ａ）、激酶２ａ和激酶３ａ．这为利用同源技术克隆植物抗病基因提供了可能．根据烟草抗花叶病毒Ｎ基因和拟南芥抗丁香假单孢杆菌ＲＰＳ２基因设计兼并引物，从大豆抗花叶病毒品种科丰１号的基因组中扩增获得３５８个克隆，鉴定出４个通读的且与抗病基因ＮＢＳ结构域同源的片段：ＫＮＢＳ１，ＫＮＢＳ２，ＫＮＢＳ３和ＫＮＢＳ４．Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交表明ＮＢＳ类抗病基因在大豆中为多拷贝家族；ＲＦＬＰ分析将ＫＮＢＳ４定位于Ｆ连锁群，而ＫＮＢＳ２则与大豆抗花叶病毒基因Ｒｓａ的ＳＣＡＲ标记同位于Ｊ连锁群．Ｎｏｒｔｈｅｒｎ分析表明ＫＮＢＳ２类在大豆的根、茎和叶中为低丰度组成型表达，这为最终克隆大豆抗病基因打下了基础．