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定点突变去除抗乙酰胆碱受体抗体的补体结合功能

Removal of complement binding activity of an anti-acetylcholine receptor antibody by site directed mutagenesis

作     者:冯相伟 陈秋艳 姜京植 穆永佳 温爱萍 李红花 李英信 孟繁平 FENG Xiang-wei;CHEN Qiu-yan;JIANG Jing-zhi;MU Yong-jia;WEN Ai-ping;LI Hong-hua;LI Ying-xin;MENG Fan-ping

作者机构:延边大学基础医学院免疫学与病原生物学教研部吉林延吉133000 

出 版 物:《延边大学医学学报》 (Journal of Medical Science Yanbian University)

年 卷 期:2008年第31卷第1期

页      面:9-12页

学科分类:1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 10[医学] 

基  金:国家自然科学基金3046012830760234 

主  题:受体,胆碱能 重症肌无力 点突变 补体结合 抗体 

摘      要:[目的]制备无补体结合功能的免疫球蛋白样抗乙酰胆碱受体抗体,用于重症肌无力的特异性免疫治疗.[方法]应用定点突变技术,将致病性抗乙酰胆碱受体抗体IgG 637的重链CH 2区的第322位氨基酸进行K 322 A突变,获得的突变型抗体IgG 637/K 322 A基因经转化大肠杆菌XL 1-Blue进行增殖,测定序列证实为突变序列,转染哺乳类细胞CHO-k 1进行表达,其产物经酶联免疫吸附试验检测与补体C 1 q的结合活性.[结果]突变型抗乙酰胆碱受体抗体IgG 637/K 322 A不能与补体C 1 q结合,而对照抗体IgG 637可与补体结合.[结论]经定点突变,成功地获得了失去补体结合功能的抗乙酰胆碱受体抗体.

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