CD34^＋细胞体外诱导的肝样细胞在小鼠体内修复受损肝组织的研究

作     者：鄢玲莉 蔡海波 陈袆祺 谭文松 

作者机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室上海200237 

出 版 物：《中国修复重建外科杂志》 (Chinese Journal of Reparative and Reconstructive Surgery)

年 卷 期：2009年第23卷第10期

页      面：1235-1240页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 08[工学] 09[农学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(20776043) 上海市生物医药重点科技攻关项目(074319109)~~ 

主　　题：CD34^+细胞 肝样细胞 体外诱导 肝损伤 ICR小鼠 

摘      要：目的研究CD34+细胞体外诱导的肝样细胞在小鼠体内修复受损肝组织的作用。方法采用密度梯度离心法分离脐血中的单个核细胞并获得富集CD34+细胞,调整细胞密度为1×105个/mL,使用含干细胞生长因子(stemcel lfactor,SCF)、肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)、EGF、抑瘤素M(oncostatinM,OSM)和bFGF的无血清培养基(5种细胞因子浓度分别为50、20、20、10、10ng/mL)体外诱导10d。取6周龄雌性ICR小鼠48只,以二乙酰氟氨和CCl4注射制备肝损伤模型。将小鼠随机分为实验组和对照组(n=24),实验组将诱导后细胞(1.6×105个/只,含CD34+细胞1×104个)通过尾静脉注射入肝损伤小鼠体内,对照组注射等量无血清培养基,术后7、14、21、28d两组分别处死6只小鼠,行HE染色、PCR凝胶电泳、免疫组织化学染色及肝功能检测。结果HE染色显示,对照组术后28d时肝组织形态恢复正常,实验组术后14d时即已恢复正常。PCR凝胶电泳和免疫组织化学染色结果显示,实验组术后各个时间点在肝组织中均可检测到表达人血清白蛋白的细胞,而对照组术后28d内均未检测到。肝功能检测结果显示,对照组术后14d时谷丙转氨酶活性恢复正常,实验组小鼠术后7d时即已恢复正常;但两组谷草转氨酶活性在28d内均未恢复。结论CD34+细胞经体外向肝细胞方向诱导分化后,能在肝损伤的小鼠体内促进受损肝组织形态和功能的恢复,并能在小鼠受损肝脏中转化为人源肝细胞。