抗HIV-1 gp120单链抗体和白喉毒素融合基因的构建及其在大肠杆菌中的表达

作     者：于芳 金宁一 李昌 刘玉生 佟敬山 胡宁宁 金洪涛 YU Fang;JIN Ning-yi;LI Chang;LIU Yu-sheng;TONG Jing-shan;HU Ning-ning;JIN Hong-tao

作者机构：军事医学科学院十一所全军基因工程重点实验室 

出 版 物：《免疫学杂志》 (Immunological Journal)

年 卷 期：2007年第23卷第5期

页      面：531-534页

核心收录：

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 10[医学] 

基　　金：吉林省科技厅项目资助(20060570) 

主　　题：HIV-1 单链抗体 基因克隆 原核表达 

摘      要：目的构建人源抗HIV-1单链抗体和白喉毒素融合基因的原核表达质粒,并诱导其在大肠杆菌中表达重组蛋白。方法通过PCR扩增,获得目前应用较多的DAB389基因片段,将其克隆入原核表达载体pET-28a,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,经SDS-PAGE和Western blot方法分析鉴定。结果酶切及DNA序列测定鉴定正确。SDS-PAGE和West-ern Blot分析证实,重组质粒可表达出相对分子质量为75200的蛋白,与DT-hs120融合基因分子量一致,其表达量约占菌体总蛋白的21%,表达形式主要为包涵体。结论成功构建了DT-hS120表达载体,并获得了高效表达。