日本血吸虫中国大陆株抱雌沟蛋白编码基因的克隆和表达

作     者：金亚美 林矫矫 冯新港 张亮 吴祥甫 周元聪 蔡幼民 

作者机构：中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所、农业部动物寄生虫学重点开放实验室 

出 版 物：《Acta Biochimica et Biophysica Sinica》 (生物化学与生物物理学报(英文版))

年 卷 期：2002年第34卷第3期

页      面：311-317页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家高技术“86 3”计划资助项目 (No .10 2 0 7 0 4 0 3) 科技部科研院所社会公益研究专项基金资助项目 (No.2 0 0 0 181) 

主　　题：日本血吸虫 抱雌沟蛋白 基因克隆 基因表达 

摘      要：根据曼氏血吸虫抱雌沟蛋白基因SmGcp序列和日本血吸虫编码抱雌沟蛋白保守区的基因片段SjGcp1分别设计三对引物 ,以日本血吸虫中国大陆株成虫mRNA为模板 ,用RT PCR法扩增出大小为 1949bp的基因片段。经序列分析推断该基因片段含编码日本血吸虫抱雌沟蛋白基因的完整阅读框 ,与SmGcp碱基一致性为 85 % ,其理论推测氨基酸组成与曼氏血吸虫抱雌沟蛋白的一致性为 83.7%。将上述扩增的基因片段克隆到表达载体pET2 8c(+)中 ,在大肠杆菌BL2 1中获得表达 ,融合表达产物分子量约为 80kD。利用日本血吸虫成虫抗原免疫血清对该表达产物进行Western印迹检测 ,在预测位置出现了明显的识别条带 ,说明该编码日本血吸虫中国大陆株抱雌沟蛋白基因的表达产物具有抗原性