野生型和C279G突变型UCHL1基因真核表达质粒构建

作     者：巴茂文 刘振国 倪培华 陈生弟 李琳 陆国强 BA Mao-wen;LIU Zhen-Guo;NI Pei-hua;CHEN Sheng-di;LI Lin;LU Guo-qiang

作者机构：上海第二医科大学瑞金医院神经内科帕金森病诊疗与研究中心上海200025 上海第二医科大学瑞金医院检验医学中心上海200025 上海第二医科大学新华医院神经内科 

出 版 物：《上海第二医科大学学报》 (Acta Universitatis Medicinalis Secondae Shanghai)

年 卷 期：2005年第25卷第5期

页      面：455-458页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家重点基础研究发展计划(973计划)(G1999054008) 上海市科委青年科技"启明星后"计划(01QMH1410)资助项目 

主　　题：UCHL1 突变型 基因真核表达 质粒构建 RT-PCR方法 真核表达质粒 L1基因 DNA测序 人野生型 羧基末端 胚脑组织 定点突变 基因序列 水解酶 SOE 基因分 插入 酶切 

摘      要：目的构建人野生型和C279G突变型pEGFP-N1-UCHL1质粒。方法采用RT-PCR方法从人胚脑组织中扩增出人泛素羧基末端水解酶1(UCHL1)基因,插入至pMD18Tvector中;再采用SOE法定点突变,通过酶切和连接,构建野生型和C279G突变型pEGFP-N1UCHL1。结果酶切和DNA测序证实,野生型和突变型UCHL1基因分别插入到pEGFP-N1中,野生型UCHL1基因序列与GenBank完全一致,C279G突变型UCHL1基因除第279位碱基C被G替代以外,其余序列与野生型完全一致。结论成功构建野生型和C279G突变型UCHL1基因真核表达质粒。