X连锁凋亡抑制蛋白反义寡核苷酸逆转K562细胞及难治性癫痫大鼠对卡马西平和苯妥英钠耐药性

作     者：陈英辉 王乃东 祖衡兵 洪震 CHEN Ying-Hui1),WANG Nai-Dong2), ZU Heng-Bing1), HONG Zhen3) (1) Department of Neurology, Jinshan Hospital ,Fudan University, Shanghai 200540;2) The Affiliated Hospital of Medical College Qingdao University, Qingdao 266003;3) Department of Neurology, Huashan Hospital , Fudan University, Shanghai 200040, China)

作者机构：复旦大学附属金山医院神经内科上海200540 青岛大学医学院附属医院青岛266003 复旦大学附属华山医院神经科上海200040 

出 版 物：《生物化学与生物物理进展》 (Progress In Biochemistry and Biophysics)

年 卷 期：2010年第37卷第6期

页      面：635-640页

核心收录：

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 1002[医学-临床医学] 100204[医学-神经病学] 10[医学] 

基　　金：上海市自然科学基金项目(09ZR1405500) 上海市卫生局局级科研项目(2008-80) 复旦大学生物医学研究院开放课题(2007)资助项目~~ 

主　　题：X连锁凋亡抑制蛋白 耐药 凋亡 反义寡核苷酸 难治性癫痫 

摘      要：凋亡在癫痫发生机制中起重要作用,但其在难治性癫痫耐药机制中的作用尚不清楚.为研究X连锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis protein,XIAP)反义寡核苷酸对K562/Dox(阿霉素诱导)耐药细胞及难治性癫痫大鼠耐药性的影响,首先建立耐药的K562/Dox细胞株,比较XIAP在耐药细胞株和正常K562细胞株的表达情况,观察转染XIAP反义寡核苷酸后,线粒体膜电位变化以及对卡马西平和苯妥英钠耐药性的影响.另外,建立慢性杏仁核点燃癫痫模型,筛选出耐药组和药物敏感组,通过侧脑室注射XIAP反义寡核苷酸,对照组注射生理盐水.观察其对各组大鼠后放电阈值(after dischargethreshold,ADT)、后放电时程(after discharge duration,ADD)等电生理指标的影响.结果发现,XIAP在K562/Dox耐药细胞上的表达明显高于正常K562细胞,XIAP反义寡核苷酸转染K562/Dox耐药细胞后,XIAP的表达明显下降.导致了K562/Dox细胞线粒体跨膜电位的下降,而且对苯妥英钠和卡马西平的耐药性明显下降,IC50分别由(1978.2±90.3)mg/L和(1875.6±83.2)mg/L,降低到(1123.5±54.2)mg/L和(1084.5±60.6)mg/L,逆转倍数分别为1.76和1.73.同时动物实验发现,耐药组大鼠在给予XIAP反义寡核苷酸后,ADT明显高于对照组(P0.05),ADD时程也明显缩短.上述结果证明,XIAP在耐药的K562/Dox细胞株存在高表达,下调XIAP在K562/Dox细胞株表达可以改善K562/Dox对卡马西平和苯妥英钠的耐药性.而且下调XIAP表达可以协助AEDs改善耐药大鼠的电生理活动,提示XIAP参与了难治性癫痫的耐药.