CD2相关蛋白在足细胞分化中的作用

作     者：姜华军 常莹 朱忠华 刘建社 邓安国 张春 JIANG Hua-Jun;CHANG Ying;ZHU Zhong-Hua;LIU Jian-She;DENG An-Guo;ZHANG Chun

作者机构：华中科技大学同济医学院附属协和医院肾内科武汉430022 华中科技大学同济医学院附属同济医院肝病研究所武汉430030 

出 版 物：《生理学报》 (Acta Physiologica Sinica)

年 卷 期：2008年第60卷第1期

页      面：135-142页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100210[医学-外科学(含：普外、骨外、泌尿外、胸心外、神外、整形、烧伤、野战外)] 10[医学] 

基　　金：supported by the National Natural Science Foundation of China (No. 30500245) the Science Research Founda-tion of Health Department of Hubei Province (No. NX200510) 

主　　题：CD2相关蛋白 足细胞 nephrin synaptopodin WT1 

摘      要：本文旨在研究肾脏足细胞的分化特点及CD2相关蛋白(CD2-associated protein,CD2AP)在足细胞分化过程中的作用。用RPMI1640培养基在33oC许可条件下培养永生化小鼠足细胞系(未分化组),转染针对CD2AP的小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)后置于37oC非许可条件下培养(转染组),并将非许可条件下未转染组作为对照组。用MTT法检测足细胞的生长速度;用RT-PCR方法检测CD2AP、WT1、synaptopodin和nephrin mRNA表达;用Westernblot检测CD2AP、WT1和nephrin蛋白表达;用免疫荧光结合激光共聚焦方法检测CD2AP、nephrin、F-actin和tubulin在分化及未分化足细胞中的分布及其共定位情况。结果显示,CD2AP、WT1和nephrin在分化及未分化足细胞中均可稳定表达,而synaptopodin仅表达于已分化足细胞,在未分化足细胞无表达。在足细胞分化过程中,CD2AP和nephrin的表达上调(P0.05);CD2AP、tubulin和F-actin在细胞内的分布发生改变,CD2AP与nephrin及F-actin在未分化足细胞中存在共定位关系。转染特异性siRNA下调CD2AP表达,细胞生长速度明显减慢,synaptopodin mRNA表达下调(P0.05),细胞分化迟滞。结果表明,足细胞分化过程中伴随细胞骨架的重新分布和细胞形态的改变;CD2AP可能作为足细胞裂孔隔膜分子与细胞骨架的连接蛋白,在足细胞分化过程中发挥重要作用。