钠钾ATP酶抑制剂通过调节DNA损伤感应复合体Mre11/Rad50/Nbs1的表达诱导肝癌HepG2细胞周期阻滞

作     者：徐忠伟 王凤梅 王聪聪 单娜娜 徐瑞成 XU Zhong-wei;WANG Feng-mei;WANG Cong-cong;SHAN Na-na;XU Rui-cheng

作者机构：中国人民武装警察部队后勤学院天津300309 天津市第三中心医院天津300170 天津市职业与环境危害生物标志物重点实验室天津300309 

出 版 物：《中国药理学通报》 (Chinese Pharmacological Bulletin)

年 卷 期：2016年第32卷第3期

页      面：323-327页

核心收录：

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 100703[医学-生药学] 1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(No 81273552) 武警后勤学院博士启动金项目(No WHB201501) 

主　　题：华蟾毒配基 HepG2细胞 DNA双链断裂 钠钾ATP酶 细胞周期 细胞周期相关蛋白 

摘      要：目的研究钠钾ATP酶抑制剂华蟾毒配基(cinobufagin)对人肝癌HepG2细胞DNA损伤修复阻断及其发生机制。方法免疫组化分析人肝癌临床组织标本、正常肝组织中钠钾ATP酶α1亚单位的表达;以人肝癌细胞HepG2为靶细胞,实验分为对照组、5μmol·L^(-1)华蟾毒配基作用6、12和24 h组;单细胞电泳检测DNA双链断裂,Real time-PCR和Western blot检测损伤修复基因Mre11、Rad50、Nbs1和p53的表达变化,流式细胞术检测细胞周期。结果肝癌组织钠钾ATP酶α1亚单位表达与癌旁组织相比明显升高(P0.05);华蟾毒配基诱导HepG2细胞DNA断裂的发生率与作用时间高度相关,作用时间延长断裂效应更加明显(P0.05),Mre11,Nbs1,Rad50和p53表达随药物作用时间延长逐渐升高(P0.05),流式细胞术分析细胞周期对照组S期细胞比例为(21.32±4.21)%,5μmol·L^(-1)华蟾毒配基处理6 h后为(33.25±5.72)%,处理12 h后为(56.72±6.29)%,作用24 h后为(67.32±9.42)%。结论华蟾毒配基激活Mre11/Rad50/Nbs1损伤感应复合体介导肝癌Hep G2细胞周期阻滞。