重组绿脓杆菌外毒素A受体结合区蛋白的初步复性及细胞生物学活性检测

作     者：刘晓明 马丛林 郭学军 朱平 王瑾琪 甄英凯 

作者机构：解放军农牧大学军事兽医研究所 

出 版 物：《中国兽医学报》 (Chinese Journal of Veterinary Science)

年 卷 期：1998年第18卷第5期

页      面：469-472页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 090601[农学-基础兽医学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金："九五"总后勤部卫生部资助 

主　　题：绿脓杆菌 外毒素A 细胞毒性 竞争抑制 

摘      要：用逐步稀释透析法将纯化的大肠杆菌表达的重组绿脓杆菌外毒素Ａ（ＰＥＡ）受体结合区蛋白初步复性，复性后的可溶性蛋白用于竞争抑制ＰＥＡ的细胞毒性实验。将１０μｇ／Ｌ的ＰＥＡ与其敏感细胞Ｌ９２９共孵育，３６ｈ左右可见细胞发生病变死亡，而同时加入复性的重组ＰＥＡ受体结合区蛋白的培养细胞孔与未加ＰＥＡ阴性对照培养细胞一样仍分裂增殖，这种ＰＥＡ细胞毒性抑制作用可持续到所有培养细胞老化死亡。结果表明，重组ＰＥＡ受体结合区蛋白可在体外竞争抑制ＰＥＡ对Ｌ９２９细胞的毒性。