TGF-β1诱导鼠肝细胞凋亡信号转导机制的研究

作     者：王春雷 黄志强 周宁新 Kevin Behrns 

作者机构：北京市解放军总医院全军肝胆外科研究所100853 University of North CarolinaChapel HillUSA 

出 版 物：《消化外科》 (Journal of Digestive Surgery)

年 卷 期：2004年第3卷第6期

页      面：439-442页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

主　　题：转化生长因子β1 凋亡 肝细胞 肝硬变 肝灌注 

摘      要：目的 本研究旨在明确TGF β1诱导鼠肝细胞凋亡与Caspase 3及Caspase 8的关系。方法 通过 5 0 %CCl4腹腔注射 ,用 8周时间诱发BALB/c小鼠形成肝硬化模型。应用改良的胶原酶原位灌注法分离小鼠的肝细胞。为检测TGF β1(5ng/ml)诱导凋亡 ,利用 1.5 %的琼脂糖凝胶电泳观察DNA梯形条带 ,应用DNA荧光染料Hoechst 33342对正常肝细胞进行染色 ,并在荧光显微镜下观察比较Caspase 3和Caspase 8在TGF β1诱导的凋亡中的作用。 结果 胶原酶原位二步灌流法分离肝细胞活率为 95 .2 %。正常肝细胞予以TGF β1处理后 ,应用 1.5 %的琼脂糖凝胶电泳可以发现具有凋亡特征的梯形条带。硬化肝细胞则很少出现梯形条带。经TGF β1处理的鼠正常肝细胞应用Hoechst染色发现 ,其凋亡率明显高于未处理组 ,分别为 5 8.76 %和 18.0 3% ,两组具有明显的差别。但凋亡可以被Caspase 3和Caspase 8抑制剂阻止。 结论 硬化肝细胞不能象正常肝细胞那样发生TGF β1诱导的凋亡 ,提示硬化肝细胞的抑制性生长调控机制已受损。TGF β1通过Caspase 3和Cas pase 8的活化诱导鼠肝细细胞产生凋亡。