猪链球菌2型次黄嘌呤核苷酸脱氢酶(IMPDH)重组蛋白的酶活性和免疫原性检测

作     者：张雪寒 何孔旺 周俊明 倪艳秀 俞正玉 吕立新 ZHANG Xue-han;HE Kong-wang;ZHOU Jun-ming;NI Yan-xiu;YU Zheng-yu;LV Li-xin

作者机构：江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心 

出 版 物：《农业生物技术学报》 (Journal of Agricultural Biotechnology)

年 卷 期：2009年第17卷第6期

页      面：943-947页

核心收录：

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：国家重大基础研究发展规划(973)项目(No.2006CB504403) 江苏省自然科学基金项目(No.BK2007124)资助 

主　　题：猪链球菌 次黄嘌呤核苷酸脱氢酶(IMPDH) 克隆 酶活性 

摘      要：通过PCR方法从猪链球菌2型(Streptococcus suis)05ZYH33分离株基因组中扩增出次黄嘌呤核苷酸脱氢酶基因(in-osine5-monophosphate dehydrogenase,impdh),长度1064bp。PCR产物和pET28a载体分别经过EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切,连接,成功地构建了重组表达质粒pET28a-impdh,并转入大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中,经过1mmol/LIPTG诱导获得表达,蛋白大小35kD。表达蛋白具有良好的抗原性和酶活性。蛋白经过亲和层析纯化后,在37℃,pH7.0~9.0表现出较强酶活性,NADHA340介于0.662~0.816之间。