稀土离子Tb^(3+)与拟南芥钙调素相互作用的荧光光谱及分析应用

作     者：肖凤娟 刘德龙 白娟 孙大业 

作者机构：石家庄铁道学院材料分院河北石家庄050043 河北师范大学化学学院河北石家庄050091 河北师范大学生命科学学院河北石家庄050091 

出 版 物：《光谱学与光谱分析》 (Spectroscopy and Spectral Analysis)

年 卷 期：2004年第24卷第8期

页      面：984-987页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 071010[理学-生物化学与分子生物学] 081704[工学-应用化学] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术] 0804[工学-仪器科学与技术] 0703[理学-化学] 0702[理学-物理学] 

基　　金：国家自然科学基金重点项目 (39730 2 30 ) 河北省博士基金项目资助 

主　　题：铽离子 拟南芥 钙调素 相互作用 荧光光谱 浓度测定 钙受体蛋白 

摘      要：钙调素 (CaM)是一种普遍存在的钙受体蛋白 ,它调节了许多细胞生物学功能。钙调素分子有 4个金属结合位点 ,而植物钙调素Ⅰ ,Ⅱ ,Ⅲ位点不含酪氨酸残基 ,只有第 4位点含一个酪氨酸残基。与动物体不同的是 ,植物能表达多种功能不同的钙调素亚型。文章利用Tb3 +荧光探针 ,采用直接激发 ( 2 2 1nm)或敏化激发 ( 2 80nm)并测量 5 4 5nm处的荧光发射强度 ,研究拟南芥CaM与Tb3 +的结合作用及分析应用。直接激发 ( 2 2 1nm)Tb3 + CaM络合物时 ,Tb3 +的发光显著增强 ,这归因于CaM中配位基取代了Tb3 +的配位水分子 ,从而导致荧光速率常数增加。直接激发滴定曲线中 ,当cTb3+/cCaM 4时 ,荧光强度呈不断上升的直线 ,之后出现平台区 ,这与CaM只结合 4个钙离子的结论一致。而间接激发滴定曲线近似为S型 ,且荧光强度较弱 ;其中当cTb3+/cCaM≤ 2时 ,荧光强度增加较弱 ;当 2 cTb3+/cCaM4时 ,荧光强度增加较大 ,这是由于与Tb3 +配位的CaM的弱结合位点中的酪氨酸残基发生显著的能量传递之故。进一步根据两类滴定曲线均在cTb3+/cCaM=4时呈现明显转折点的事实 ,建立一种测定钙调素浓度的方法。此方法估测CaM浓度具有灵敏度 ,准确度较高 。