巢式-多重RT-Realtime PCR检测马铃薯黑环斑病毒的研究

作     者：粟智平 耿金培 鲁闽 张京萱 王颖 Su Zhiping;Geng Jinpei;Lu Ming;Zhang Jingxuan;Wan Ying

作者机构：烟台出入境检验检疫局山东烟台264000 

出 版 物：《检验检疫科学》 (Inspection and Quarantine Science)

年 卷 期：2009年第19卷第2期

页      面：12-15页

学科分类：0710[理学-生物学] 071010[理学-生物化学与分子生物学] 081704[工学-应用化学] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术] 09[农学] 0904[农学-植物保护] 090401[农学-植物病理学] 090402[农学-农业昆虫与害虫防治] 

主　　题：马铃薯黑环斑病毒(PBRSV) 巢式-多重RT-RealtimePCR 检测 

摘      要：马铃薯黑环斑病毒(Potato black ringspot virus,PBRSV)是马铃薯重要病毒病害之一。本研究根据PBRSV基因组中RNA依赖的RNA聚合酶(RDRP)保守序列,设计合成了两对巢式PCR引物和1条Taq-MAN荧光探针,建立了巢式-多重RT-Realtime PCR检测PBRSV的新方法。该方法采用***试剂盒快速提取植物总RNA,并有机地结合了巢式PCR、多重PCR和探针检测技术。实验结果表明,该方法检测灵敏度可达450fg/μL植物总RNA。利用4对引物和1条TaqMAN探针对PCR阳性产物进行确认,本方法检测的准确性、灵敏度比巢式PCR、单重Realtime PCR等方法高。