腺病毒介导c-FLIPs基因诱导淋巴细胞抗凋亡作用

作     者：冯子毅 李宝金 刘晓平 FENG Zi-yi;LI Bao-jin;LIU Xiao-ping

作者机构：北京大学深圳医院肝胆胰外科深圳518036 

出 版 物：《中华实验和临床病毒学杂志》 (Chinese Journal of Experimental and Clinical Virology)

年 卷 期：2005年第19卷第2期

页      面：114-117,i001页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目 (3 0 3 713 86) 广东省自然科学基金资助项目 (3 10 10 ) 深圳市科技计划项目 (2 0 0 2 0 40 93 ) 深圳市科技计划项目 (2 0 0 3 0 412 7) 

主　　题：抗凋亡作用 腺病毒介导 基因诱导 RT-PCR方法 Adeasy系统 T淋巴细胞株 重组腺病毒 流式细胞仪检测 Hoechst 流式细胞仪分析 显微镜下观察 Ps基因 PI染色 Apo-1 细胞染色质 细胞凋亡率 细胞核 病毒诱导 总RNA 构建表达 凋亡细胞 

摘      要：目的 探讨表达c FLIPs重组腺病毒诱导淋巴细胞抗凋亡作用。方法 采用RT PCR方法,从人T淋巴细胞株的总RNA中克隆c FLIPs基因;通过pAdeasy系统,构建表达c FLIPs的重组腺病毒Ad c FLIPs;Hochest染色法及PI染色流式细胞仪检测anti Apo 1诱导感染Ad c FLIPs后的H9细胞凋亡。结果 采用RT PCR方法从人T淋巴细胞株中扩增出c FLIPs基因;构建重组腺病毒Ad c FLIPs ;经Hoechst染色,荧光显微镜下观察细胞核的形态,结果发现,经anti Apo 1诱导凋亡处理2 4h后,未经Ad c FLIPs感染的H9细胞有大量的细胞核呈浓染致密的固缩形态或颗粒状荧光的凋亡细胞;Ad c FLIPs感染的H9细胞中细胞核呈浓染致密的固缩形态或颗粒状荧光的细胞数明显减少,大部分细胞染色质呈弥漫均匀低强度荧光;流式细胞仪分析经PI染色后的H9细胞,未经Ad c FLIPs预处理的H9细胞在anti Apo 1作用2 4h后,细胞的凋亡率分别为4 8 33%±7 4 1% ;经Ad c FLIPs预处理1d的H9细胞,其细胞凋亡率分别下降到3 6 0 %±0 2 1%。结论 重组腺病毒Ad c FLIPs可有效地诱导淋巴细胞的抗凋亡作用。