检索结果-南通市图书馆

改良CTAB法提取不同作物总rna技术研究

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国农学通报 2024年第11期40卷 28-35页

作者：刘国梅郭淑慧孙璇姚琳张高扬杜春芳山西农业大学农学院山西晋中030801 山西农业大学棉花研究所山西运城044000

为提高操作效率,本研究开发出一种简洁有效的作物总rna提取方法。研究以油菜、棉花、花生、小麦、马铃薯、玉米、大豆、西葫芦等作物的不同组织为试材,通过CTAB法、改良CTAB法及TanSzol Reagent试剂盒法提取总rna,检测结果发现,经过改... 详细信息

为提高操作效率,本研究开发出一种简洁有效的作物总rna提取方法。研究以油菜、棉花、花生、小麦、马铃薯、玉米、大豆、西葫芦等作物的不同组织为试材,通过CTAB法、改良CTAB法及TanSzol Reagent试剂盒法提取总rna,检测结果发现,经过改良后的CTAB法提取的总rna质量较高。在油菜花瓣、小麦、花生、西葫芦叶片中,该方法获得了较高的总rna得率,分别为24.5、23.7、26.4、17.35μg/mL;OD260/280和OD260/230值分别为1.90、1.73、1.72、1.80和2.10、1.50、2.01、1.70。综合比较以上3种方法,改良后的CTAB法适用于油菜、小麦、花生、西葫芦等作物的总rna提取,为后续分子生物学检测奠定了基础。

关键词：改良CTAB法总rna rna提取

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

半夏块茎高质量总rna提取的一种有效方法

中国中药杂志 2008年第15期33卷 1810-1813页

作者：黄月琴徐有明薛建平淮北煤炭师范学院生命科学学院安徽淮北235000 华中农业大学园艺林学学院湖北武汉430070

目的：探讨一种有效提取半夏块茎总rna方法。方法：以半夏试管苗的叶片、叶柄和块茎为试验材料，将常规的异硫氰酸胍提取植物总rna的方法做了改进，在rna提取缓冲液中加入高浓度的β-巯基乙醇以除去酚类物质，用酸酚／氯仿抽提去除蛋白... 详细信息

目的：探讨一种有效提取半夏块茎总rna方法。方法：以半夏试管苗的叶片、叶柄和块茎为试验材料，将常规的异硫氰酸胍提取植物总rna的方法做了改进，在rna提取缓冲液中加入高浓度的β-巯基乙醇以除去酚类物质，用酸酚／氯仿抽提去除蛋白质污染，以及利用异丙醇和醋酸钠联合沉淀多糖等手段，建立了一种简单实用的从富含多酚类和多糖等物质的植物材料中提取总rna的方法。结果：该方法所提rna的A260/A230均大于2．0，A260/A230的值为1．7～2．0，电泳条带清晰，rna完整性好。结论：利用本方法提取的半夏试管小块茎总rna具有很高的质量和纯度，且得率很高，完全满足后续的DDRT-PCR和反向Northern blotting等分子生物学研究，而且简单经济、实验结果稳定，重复性好，适合富含多酚类和多糖等物质的药用植物组织总rna的提取。

关键词：半夏试管块茎多酚类物质多糖总rna 提取

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

从矿化的骨组织中提取骨细胞的总rna

生物化学与生物物理进展 2001年第4期28卷 584-586页

作者：郭若霖郭善一左爱军梁东春张镜宇天津医科大学内分泌研究所天津300070

描述了两个从以含大量羟基磷灰石 (钙 )和细胞密度、数量甚低为特点的矿化的成年骨组织 (成年大鼠颅骨 )提取总rna的改进方法 .紫外分光光度法 (A2 60 、A2 80 和A2 3 0 )和 1%甲醛变性琼脂糖凝胶电泳予以鉴定 .进而以其逆转录的cDNA为... 详细信息

描述了两个从以含大量羟基磷灰石 (钙 )和细胞密度、数量甚低为特点的矿化的成年骨组织 (成年大鼠颅骨 )提取总rna的改进方法 .紫外分光光度法 (A2 60 、A2 80 和A2 3 0 )和 1%甲醛变性琼脂糖凝胶电泳予以鉴定 .进而以其逆转录的cDNA为模板扩增出 β actin和BMP 2基因 ,均表明所得总rna完整和模板活性俱佳 .每克骨组织中总rna产量为 5 6 0

关键词：总rna 骨组织 RT-PCR 基因表达提取

一种提取富含油脂植物组织总rna的改良SDS酸酚法

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

应用与环境生物学报 2009年第2期15卷 284-287页

作者：罗绍银高继海叶生亮徐莺陈放四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室成都610064

采用常规的方法提取富含油脂的植物组织总rna常难以取得满意的结果.对林莎两次裂解法进行了改良,即将SDS的浓度降低至1%,所用酸酚的pH值降低至4.0,去掉提取液II处理步骤,获得的总rna效果较好:得率高,rna产量可达74.7μg(100mg)-1;没有DN... 详细信息

采用常规的方法提取富含油脂的植物组织总rna常难以取得满意的结果.对林莎两次裂解法进行了改良,即将SDS的浓度降低至1%,所用酸酚的pH值降低至4.0,去掉提取液II处理步骤,获得的总rna效果较好:得率高,rna产量可达74.7μg(100mg)-1;没有DNA污染,A260nm/A280nm值为2.026,A260nm/A230nm值为2.082,说明蛋白质及其它污染非常低,通过RT-PCR成功地扩增出了麻疯树curcin基因长为927bp的特异条带.相比林莎的方法,改良SDS酸酚法具有经济、简便、适用性广的特点.

关键词：总rna 麻疯树油脂 SDS酸酚法胚乳

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

甜玉米籽粒总rna提取方法的比较

园艺与种苗 2022年第1期42卷 67-68,71页

作者：于惠琳吴玉群王延波张洋辽宁省农业科学院玉米研究所辽宁沈阳110161

[目的]探索获得高质量、高纯度的甜玉米籽粒总rna的提取方法。[方法]以授粉后20 d的超甜玉米系SY01籽粒为试验材料,比较了rnaiso法、Trizol法、CTAB法3种方法对甜玉米籽粒总rna的提取效果,用琼脂糖凝聚电泳、Nanodrop2000、Agilent 2100... 详细信息

[目的]探索获得高质量、高纯度的甜玉米籽粒总rna的提取方法。[方法]以授粉后20 d的超甜玉米系SY01籽粒为试验材料,比较了rnaiso法、Trizol法、CTAB法3种方法对甜玉米籽粒总rna的提取效果,用琼脂糖凝聚电泳、Nanodrop2000、Agilent 2100 Bioanalyzer检测了提取的rna的完整性、纯度和浓度。[结果]rnaiso法提取的总rna样品,OD_(260/280)值为2.09,浓度为1 250 ng/μL,RIN值为8.6,条带清晰完整,获得率高,质量好。[结论]rnaiso法适合玉米籽粒总rna的大量提取,总rna产物可直接用于Micro rna和转录组测序等试验。

关键词：甜玉米籽粒总rna

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

茶树叶片总rna提取方法的比较研究

植物生理学报 2013年第1期49卷 95-99页

作者：王梦娜武艳程国山张今今陕西师范大学生命科学学院西安710062

针对茶树叶片中富含多酚类物质的特点,以陕西地方茶树代表种质紫阳槠叶种的叶片为材料,比较了Trizol法、异硫氰酸胍法和改良SDS-酸酚法三种不同的总rna提取方法。结果表明改良SDS-酸酚法能够从新鲜叶片、冷冻叶片和干燥叶片中提取到质... 详细信息

针对茶树叶片中富含多酚类物质的特点,以陕西地方茶树代表种质紫阳槠叶种的叶片为材料,比较了Trizol法、异硫氰酸胍法和改良SDS-酸酚法三种不同的总rna提取方法。结果表明改良SDS-酸酚法能够从新鲜叶片、冷冻叶片和干燥叶片中提取到质量高、完整性好的总rna,经检测28Srrna亮度为18Srrna的2倍,A260/A280值介于1.83～2.01之间。以鲜叶、冻叶和干燥叶片的总rna为材料,进一步用于DDRT-PCR分析,均可获得清晰稳定的多态性结果。说明改良的SDS-酸酚法能抑制茶树叶片中多酚类物质对总rna提取的影响,是一种适于茶树叶片总rna提取的有效方法。

关键词：茶树改良SDS-酸酚法总rna 多酚

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

蟠桃果实总rna提取方法的研究

新疆农业科学 2012年第9期49卷 1644-1649页

作者：史元敏何天明袁海英新疆农业大学林学与园艺学院乌鲁木齐830052

【目的】筛选获得提取蟠桃果肉中总rna的适宜方法。【方法】以盛花后100 d的蟠桃为材料,采用Transplant plus植物总rna提取试剂提取法、rnaisoTM试剂盒法、改良SDS法、改良CTAB法等四种方法提取总rna。【结果】两种试剂盒法提取的总rna... 详细信息

【目的】筛选获得提取蟠桃果肉中总rna的适宜方法。【方法】以盛花后100 d的蟠桃为材料,采用Transplant plus植物总rna提取试剂提取法、rnaisoTM试剂盒法、改良SDS法、改良CTAB法等四种方法提取总rna。【结果】两种试剂盒法提取的总rna质量差,有严重的基因组污染;改良SDS法提取物中含有大量的多糖;采用改良CTAB法所得rna完整性好,条带清晰无降解,无基因组污染。经过RT～PCR和Northern blot检测后,表明该rna能够满足后续分子生物学操作的要求。【结论】蟠桃果实总rna适宜提取方法-改良CTAR法的确定为后续果实发育分子生物学的研究奠定了基础。

关键词：蟠桃果实总rna 改良CTAB法

鸢尾属植物花器官总rna不同提取方法的比较分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

西南农业学报 2021年第1期34卷 113-118页

作者：罗梦瑶王有国马璐琳云南农业大学园林园艺学院云南昆明650201 云南省农业科学院花卉研究所/云南省花卉育种重点实验室/国家观赏园艺工程技术研究中心云南昆明650205

【目的】为了探索更适合鸢尾属植物花朵总rna的提取方法。【方法】以新鲜的鸢尾(Iris tectorum Maxim.)和冷冻的西南鸢尾(I. bulleyana Dykes)的花蕾为材料,分别采用Trizol法、Trans Zol Plant试剂盒法和EasyPure Plant rna Kit试剂盒法... 详细信息

【目的】为了探索更适合鸢尾属植物花朵总rna的提取方法。【方法】以新鲜的鸢尾(Iris tectorum Maxim.)和冷冻的西南鸢尾(I. bulleyana Dykes)的花蕾为材料,分别采用Trizol法、Trans Zol Plant试剂盒法和EasyPure Plant rna Kit试剂盒法等3种方法提取它们的花蕾总rna,通过琼脂糖凝胶电泳检测rna的完整性,利用超微量紫外分光系统检测rna的纯度和浓度,比较3种不同试剂提取得到的总rna的质量和浓度。【结果】对于冷冻的西南鸢尾花蕾组织,只有Trans Zol Plant试剂盒法可以提取出纯度好、浓度高的rna。而对于新鲜的鸢尾花蕾,3种方法提取出的rna均可用于后续试验,但质量和浓度有一定差异,EasyPure Plant rna Kit试剂盒法提取出的rna质量最好且产量较高;Trans Zol Plant试剂盒法提取出的rna质量较好但产量最高;Trizol法提取出的rna品质较好但产量最低。【结论】综合植物样品材料、rna纯度和得率及费用等因素,EasyPure Plant rnaKit试剂盒法适合需要获得高质量的rna和有新鲜的植物材料时使用;TransZol Plant试剂盒法适合在需要大量rna但对rna的质量要求不是很高时使用,且较适合应用于冷冻的鸢尾花朵。研究结果为鸢尾属植物的分子生物学深入研究提供一定研究基础,也为其它植物花朵总rna的提取提供必要的参考。

关键词：鸢尾西南鸢尾总rna 纯度和浓度

一种自制的rna分离试剂及其在鱼组织总rna提取中的应用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

西北农林科技大学学报（自然科学版） 2012年第7期40卷 64-69,76页

作者：徐坤李铎张优优李陇平麻丽霞张智英西北农林科技大学动物科技学院陕西杨凌712100

【目的】尝试自制一种价格低廉的rna分离试剂,并检验其应用效果。【方法】以商业化的TRizolReagent为对照,使用自制rna分离试剂提取草鱼皮肤组织总rna,采用分光光度计法、变性琼脂糖凝胶电泳法和RT-PCR检测其品质,并用提取的总rna合成... 详细信息

【目的】尝试自制一种价格低廉的rna分离试剂,并检验其应用效果。【方法】以商业化的TRizolReagent为对照,使用自制rna分离试剂提取草鱼皮肤组织总rna,采用分光光度计法、变性琼脂糖凝胶电泳法和RT-PCR检测其品质,并用提取的总rna合成草鱼皮肤cDNA。同时使用自制rna分离试剂提取斑马鱼总rna,通过RT-PCR进行E2F5基因全长(1 092bp)的克隆,构建其真核和酵母表达载体并测序。【结果】使用自制rna分离试剂提取草鱼皮肤组织总rna的品质与用TRizol Reagent提取的总rna品质相当,用之成功地合成了草鱼皮肤cDNA。使用自制rna分离试剂提取得到了更高品质的斑马鱼总rna,用之成功地克隆了斑马鱼E2F5基因,构建了其真核表达载体pcDNA3.1-flag-Zf E2F5和酵母表达载体pGAD GH-Zf E2F5。【结论】自制rna分离试剂能够用于鱼类组织总rna的提取,提取的总rna能满足后续cDNA合成及RT-PCR克隆特定基因的需要。

关键词： rna分离试剂总rna 草鱼皮肤cDNA 斑马鱼E2F5基因